使用膠體金快速檢測試劑盒檢測含量相當于0、200、500、1000、2 000和5 000 μg/kg的嘔吐素標準品結果如圖1,隨著嘔吐素濃度增加,T線顏色變淺。對于含量大于或等于食品中嘔吐素限量(1000 μg/kg)標準品T線顏色明顯淺于C線,呈陽性;對于含量相當于5 000 μug/kg濃度的標準品T線依然有顯色,說明該試劑盒檢測嘔吐素含量極限大于5000μgkg,能夠滿足市面檢測要求??贵w能與目標物結構相似物質發(fā)生交叉反應,造成結果假陽性率高,使得膠體金測試卡特異性差。食品安全快速檢測是指包括樣品制備在內(nèi),能夠在短時間內(nèi)出具檢測結果的行為。武漢苯并芘膠體金檢測卡
膠體金檢測卡顯色原理完整梳理膠體金檢測卡是一種快速診斷試紙,寵物醫(yī)生們都知道膠體金檢測卡有兩條顯示線T線和C線。加樣反應一段時間,C線一定顯色(除了檢測板出現(xiàn)問題的狀況),T線顯色為陽性,不顯色為陰性。那么C、T線是如何顯色的?檢測板的原理是什么?C線為什么會有不顯色的時候?下面小編將用通俗的言辭給你解釋關于膠體金檢測卡的原理。膠體金檢測板是利用免疫層析法進行定性檢測的。這就涉及了抗原抗體的特異性反應。所謂特異性:就是某種抗體專一性的識別結合某種抗原決定簇。C、T線上分別固定有兩種不同的抗體,分別識別不同的抗原決定簇。其中T線抗體識別待測抗原,C線抗體識別膠體金偶聯(lián)的抗體。檢測板的內(nèi)部有一個膠體金結合墊,表面分布有膠體金顆粒,膠體金可以理解為一種顯色標記物,同時與一種抗體偶聯(lián)。C、T線顯示出的紅色就是膠體金大量聚集的結果。湖南****膠體金檢測卡食品安全快速檢測的優(yōu)點:所謂快檢,其特點當然是“快”,也就是快速、簡單、靈敏。
膠體金的制備并不難,但要制好高質量的膠體金卻也并非易事。膠體金檢測,醫(yī)學術語,膠體金是一種常用的標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,有其獨特的優(yōu)點。近年已在各種生物學研究中使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能利用到。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),形成帶負電的疏水膠溶液,由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱膠體金。
間接法主要用于檢測抗體。如果膠體金檢測平臺使用的是間接法,則試劑條的結合墊上固定的是帶有膠體金標記的ProteinA(ProteinA能夠與抗體非特異性結合),NC膜上的T線固定的是能與待測抗體特異性結合的抗原,NC膜上的C線固定的是抗ProteinA抗體。膠體金免疫層析法:將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上,膠體金標記試劑(抗體或單克隆抗體)吸附在結合墊上,當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后,通過毛細作用向前移動,溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應,再移動至固定的抗原或抗體的區(qū)域時,待檢物與金標試劑的結合物又與之發(fā)生特異性結合而被截留,聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結果。該法現(xiàn)已發(fā)展成為診斷試紙條,使用十分方便。膠體金檢測卡為了食品安全,相關部門可以通過瘦肉精檢測卡來確定是否含有瘦肉精。
膠體金檢測卡使用時將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25 °C)平衡30 min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。 洗滌液在使用前也需回溫。 將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。加標準品/樣本:加標準品/樣本50μL到對應的微孔中,再加入三聚氰胺酶標物50μL/孔,再加入三聚氰胺抗試劑50μL /孔輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫25°C避光環(huán)境中反應30 min。沙丁胺醇膠體金檢測卡應用了競爭抑制免疫層析原理。中國臺灣呋喃唑酮膠體金檢測卡
膠體金免疫層析法將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上。武漢苯并芘膠體金檢測卡
食品安全快速檢測分為現(xiàn)場快速檢測和實驗室快速檢測。實驗室快速檢測著重于利用一切可以利用的儀器設備對檢測樣品進行快速定性與定量;現(xiàn)場快速檢測著重于利用一切可以利用的手段對檢測樣品快速定性與半定量?,F(xiàn)場的食品快速檢測方法要求:實驗準備簡化,使用的試劑較少,配制好的試劑保存期長;樣品前處理簡單,對操作人員要求低;分析方法簡單、準確和快速。國內(nèi)外食品安全中常用的快速檢測技術有化學比色分析檢測技術、分子生物學分析檢測技術、免疫學分析檢測技術以及生物傳感器、納米技術等。由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱膠體金。武漢苯并芘膠體金檢測卡
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