貴州比較好的HE染色

HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細(xì)胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。南京英瀚斯，專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務(wù)。貴州比較好的HE染色

HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤，這樣會導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。新疆推薦的HE染色公司腎臟組織HE染色如何觀察。

HE染色注意事項：1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當(dāng)，樹脂封固時不能有氣泡。

HE染色原理1、細(xì)胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。2、細(xì)胞漿染色的原理：伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點（4.7—5.0）以下時，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項 。

HE染色知識點1：對送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的，應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明，有特殊要求（如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等）應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系，并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識點2：組織取材要求在對送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上，根據(jù)診斷的需要，確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號或標(biāo)記，以便鏡檢時核對。另外，盡可能在取材前對有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影，并編號存檔南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。冰凍切片是否可以做HE染色？質(zhì)量好的HE染色哪家好

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HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時間過長；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時，停留時間相對均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對策：每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。貴州比較好的HE染色

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