陜西靠譜的HE染色檢測(cè)

HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時(shí)組織太厚，固定過(guò)久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過(guò)度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開(kāi)固定。（2）制片過(guò)程有問(wèn)題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時(shí)，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時(shí)間過(guò)短或脫蠟液使用過(guò)久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過(guò)少，著色不均勻；或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn)，這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。骨組織HE染色的操作流程。陜西靠譜的HE染色檢測(cè)

HE染色等常規(guī)染色，組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因：石蠟切片對(duì)組織的形態(tài)保存比冰凍切片好，并且對(duì)抗原基本無(wú)影響。脂質(zhì)染色（油紅O染**odipy染色，尼羅紅染色）必須做冰凍切片，不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色，ATP染色，膽固醇染色。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片，將標(biāo)本取出來(lái)千萬(wàn)不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定（在固定液內(nèi)邊解凍邊固定）。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序：新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片＞組織-80°冷凍后直接冰凍切片。河北結(jié)果客觀的HE染色分析HE染色過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題以及應(yīng)對(duì)方法。

HE染色標(biāo)本一般是針對(duì)石蠟標(biāo)本，脂滴和石蠟都是的有機(jī)物， 都具有非極，脂滴應(yīng)該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對(duì)細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法。 H:Hematoxylin，蘇木精 E:Eosin，伊紅 蘇木精（Hematoxylin,H）是一種堿染料，可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色，被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。 伊紅（，E）是一種酸染料，能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色，被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，***入蒸餾水，就可染色。南京英瀚斯生物

HE染色是目前國(guó)內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞，可直接影響疾病診斷的及時(shí)與準(zhǔn)確性。因此，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片，是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定，固定狀態(tài)良好后，嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SOP程序進(jìn)行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片，在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況，對(duì)切片中基本病理改變?nèi)绯溲⒂傺?、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機(jī)化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述，并反映出片子之間的差異。對(duì)典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識(shí)。冰凍組織切片的HE染色。

HE染色觀察細(xì)胞凋亡，凋亡檢測(cè)中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后，在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察，通過(guò)觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類(lèi)型來(lái)判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備：對(duì)于貼壁細(xì)胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上，然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對(duì)于懸浮細(xì)胞，用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后，離心1000r/min收集細(xì)胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學(xué)顯微鏡下，貼壁細(xì)胞由原來(lái)的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細(xì)胞，整個(gè)細(xì)胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質(zhì)顏色加深等。專(zhuān)業(yè)的HE染色服務(wù)平臺(tái)，南京英瀚斯生物。天津性?xún)r(jià)比高的HE染色外包

南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的技術(shù)提供專(zhuān)業(yè)的HE染色服務(wù)。陜西靠譜的HE染色檢測(cè)

HE染色細(xì)胞質(zhì)過(guò)染分析及應(yīng)對(duì)原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過(guò)的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對(duì)策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時(shí)間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí)，停留時(shí)間相對(duì)均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對(duì)原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對(duì)策：每天染色前仔細(xì)過(guò)濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過(guò)多的金屬膜產(chǎn)生。陜西靠譜的HE染色檢測(cè)

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