細胞屬性的判定,免疫組化也可以進行這方面的臨床應用。通過特定抗體標記出細胞內(nèi)相應的抗原成分,來判定細胞的屬性,確定cancer的來源。如細胞角蛋白(CK)是上皮性標記,CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽性;血管源性cancer中內(nèi)皮細胞標記物CD34陽性等等。如果您需要做實驗外包,可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。免疫組化的樣本保存要求是什么?遼寧動物組織免疫組化怎么選擇
免疫組化的發(fā)展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(IHC)是一種很重要的技術和手段,從20世紀70年代開始,免疫組化技術就應用于病理診斷,對于診斷cancer、cancer分類、判斷預后產(chǎn)生了巨大的影響,同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認識,提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應用,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術,必須熟悉各種抗體真陽性反應部位,實現(xiàn)實驗室間免疫組化標準化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關的實驗,可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。遼寧動物組織免疫組化怎么選擇病理免疫組化多少錢?
免疫組化結(jié)果要如何分析?
(1)陽性著色細胞計數(shù)法。在40*光鏡下,隨機選擇不重疊的10個視野,機器或人工計數(shù)陽性著色細胞,每組3~6張不同動物組織切片,然后進行組間比較即可。
(2)灰密度分析法??梢酝ㄟ^在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進行灰密度分析,然后進行統(tǒng)計分析即可。
(3)評分法。用光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽性范圍進行評分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),**終可以分數(shù)相加,再進行比較。對于以上這幾種方法,各有利弊,請細心選擇。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片。
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免疫組化實驗所用的抗體
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。
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免疫組化常用的染色方法
根據(jù)標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 免疫組化樣本如何處理?
確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤,用免疫組化技術有助于確定惡性cancer的組織學來源,進一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結(jié)蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預后提供了依據(jù)。英瀚斯生物,專業(yè)病理老師負責免疫組化外包!遼寧動物組織免疫組化怎么選擇
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免疫組化原理及實驗步驟——實驗外包。眾所周知,抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質(zhì)提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫實驗動物,制備特異性抗體,再用這種抗體(第1抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,形成抗原 - 一抗 - 二抗復合物,將抗原放大,由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復合物是無色的,因此,還必須借助于組織化學方法將抗原抗體反應部位顯示出來。通過抗原抗體反應及呈色反應,顯示細胞或組織中的化學成分,在顯微鏡下可清晰看見細胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應產(chǎn)物,從而能夠在細胞或組織原位確定某些化學成分的分布、含量。遼寧動物組織免疫組化怎么選擇