云南推薦實驗動物模型制作方法

5XFAD轉基因實驗動物模型。5XFAD小鼠在小鼠Thy1.2啟動子的控制下過度表達人類APP和PSEN1蛋白，共有5個AD連鎖突變，分別是APP中的瑞典（K670N/M671L）、佛羅里達（I716V）和倫敦（V717I）突變，以及PSEN1中的M146L和L286V突變。1.5個月大的5XFAD小鼠就開始出現(xiàn)Aβ沉積。5XFAD小鼠在大腦中積累的Aβ42多于Aβ40，這表明5個FAD突變累積影響Aβ42的產生。然而，在5XFAD小鼠中未觀察到tau過度磷酸化和NFTs的形成。2個月大時出現(xiàn)星形膠質細胞增生和小膠質細胞增生，表明神經炎癥發(fā)生在該模型早期。5XFAD小鼠再現(xiàn)了人類AD的病理學，類似于Tg2576、APP23和APPPS1模型。英瀚斯生物，實驗動物模型，飼養(yǎng)、造模、取材、檢測一站式完成。云南推薦實驗動物模型制作方法

常見自發(fā)性實驗動物模型1.免疫缺陷動物疾病模型1）B淋巴細胞缺陷疾病模型CBA/A小鼠，起源于CBA/H品系，特點是B淋巴細胞功能減退，為X-鏈隱性突變系，基因符號是Xid。臨床表現(xiàn)為免疫球蛋白缺失，細胞免疫正常。2）T淋巴細胞缺陷疾病模型裸小鼠，主要特征為無毛、裸著的、無胸腺和細胞免疫功能喪失，由于第十一對染色體上等位基因突變引起。該鼠免疫能力低，易傳染，生長不良，繁殖力低。這種動物能接受同種或異種組織移植，包括人cancer異種移植，可作為cancer免疫研究。國內常用裸小鼠品系為BALB/Cnu/nu,Swissnu/nu和NCnu/nu等，維持費較高?，F(xiàn)也有裸大鼠、裸豚鼠等。圖片2.自發(fā)性糖尿病動物模型KK糖尿病小鼠屬先天遺傳缺陷性小鼠。該鼠對胰島素不敏感、對葡萄糖耐性小、糖尿病發(fā)病率高、老年鼠偶見肥胖。BBWistar大鼠是一種典型自發(fā)遺傳Ⅰ型（胰島素依賴性）糖尿病，發(fā)病率50-70%，臨床表現(xiàn)為多飲、多食、gao血壓、酮癥、胰島內β-細胞大量破壞等。NIH肥胖大鼠(SHR/N-cp)是新培育的一種用于肥胖和糖尿病研究的動物模型，表現(xiàn)出與人非胰島素依賴性糖尿病相似的代謝改變。湖南實驗動物模型檢測英瀚斯生物，可承接實驗動物模型藥效實驗。

肝切除實驗動物模型造模方法：大小鼠的肝葉形狀和大小不同。因此，切除每個肺葉需要特別注意其獨特的形狀和血管位置。左外側葉很容易切除，因為它有一個狹窄的包含門靜脈和肝靜脈的蒂，并且不與下腔靜脈旁肝相連。然而，如果切除***于切除左側肝外葉（30%切除模型），則必須在肝左門區(qū)分離左側正中門靜脈和伴隨的肝動脈。

英瀚斯具備專業(yè)動物房、動物實驗室、造模操作人員，承接實驗動物模型。

由于正中葉在腔靜脈周圍有一個較寬的半基部，切除該葉需要在距腔靜脈3mm的距離處進行幾次夾持。單純結扎肝葉的寬基部切除術有很高的風險導致腔靜脈收縮和殘端肝組織損傷，因為大量結扎容易導致剩余肝組織變形。由于右上葉位于腔靜脈上，基部非常寬，并向背側延伸至右腔靜脈旁肝組織，因此技術上**難切除。切除需要小心地將夾鉗放置在離腔靜脈3毫米的距離處，并使用4或5條穿刺縫線，以避免損傷殘端和腔靜脈旁肝組織（圖6）。由于約70%的下腔靜脈旁組織由右上門靜脈的一個分支供應，這種潛在的損傷可能對小的殘肝非常重要。

理想的人類疾病實驗動物模型應該是標準化的，可重復再現(xiàn)的。應盡量選擇標準化實驗動物，也應在標準化動物實驗設施內完成，要均一性。復制的動物模型來應該力求可真實地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種機能、代謝、結構變化，應具備該種疾病的主要癥狀和體征，經化驗或X光照片、心電圖、病理切片等證實。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應病變的動物，就不應加以選用，易產生與復制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。供醫(yī)學實驗研究用的動物模型，在復制時，應盡量考慮到今后臨床應用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開展。如雌ji素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠。因此，選用雌ji素復制大鼠和小鼠終止早期妊娠的模型是不適用的。有的動物對某致病因子特別敏感，極易死亡，也不適用。如狗腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎很快死亡（80% 24小時內死亡），來不及做實驗醫(yī)療觀察，而且糞便劑量及細菌菌株不好控制，因此不能準確重復實驗結果。英瀚斯生物，承接大鼠實驗動物模型。

實驗動物模型建模的原則。相似性，重復性，可靠性，適用性和可控性，易行性和經濟性。在動物身上復制人類疾病模型。目的在于從中找出可以推廣（外推）應用于病人的有關規(guī)律。外推法（Extrapolation）要冒風險，因為動物與人到底不是一種生物。例如在動物身上無效的藥物不等于臨床無效，反之也然。因此，設計動物疾病模型的一個重要原則是，所復制的模型應盡可能近似于人類疾病的情況。能夠找到與人類疾病相同的動物自發(fā)性疾病當然比較好。英瀚斯生物公司 動物房、手術操作實驗室，可制作各類實驗動物模型。廣西好的實驗動物模型外包

實驗動物模型基因敲除、表性分析。云南推薦實驗動物模型制作方法

裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動物模型，它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。

造模方法：

1、細胞是貼壁細胞，細胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細胞傳代培養(yǎng)：當細胞長至80-90%時，去除培養(yǎng)基，加入PBS洗1-2次，去除PBS后，加入1ml胰酶消化1-3min后，加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化，將消化的細胞轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。倒掉上清后，加入3ml培養(yǎng)基重懸細胞，1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

2、將長到培養(yǎng)皿80%-90%的細胞用胰酶消化下來，1000rpm離心，去除上清，加入完全培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞分別種在6孔板中，每孔種1×105個細胞。

3、將細胞進行擴增培養(yǎng)，對細胞進行計數(shù)，將數(shù)量調整為2×107個細胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應性飼養(yǎng)7天后，隨機分為3組，每組分別在右腋皮下接種2×106（100ul/只）細胞。接種約兩周后出現(xiàn)結節(jié)，每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠，取裸鼠瘤拍照凍存。 云南推薦實驗動物模型制作方法