云南推薦實驗動物模型制作方法

5XFAD轉(zhuǎn)基因?qū)嶒瀯游锬Ｐ汀?XFAD小鼠在小鼠Thy1.2啟動子的控制下過度表達(dá)人類APP和PSEN1蛋白，共有5個AD連鎖突變，分別是APP中的瑞典（K670N/M671L）、佛羅里達(dá)（I716V）和倫敦（V717I）突變，以及PSEN1中的M146L和L286V突變。1.5個月大的5XFAD小鼠就開始出現(xiàn)Aβ沉積。5XFAD小鼠在大腦中積累的Aβ42多于Aβ40，這表明5個FAD突變累積影響Aβ42的產(chǎn)生。然而，在5XFAD小鼠中未觀察到tau過度磷酸化和NFTs的形成。2個月大時出現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞增生和小膠質(zhì)細(xì)胞增生，表明神經(jīng)炎癥發(fā)生在該模型早期。5XFAD小鼠再現(xiàn)了人類AD的病理學(xué)，類似于Tg2576、APP23和APPPS1模型。英瀚斯生物，實驗動物模型，飼養(yǎng)、造模、取材、檢測一站式完成。云南推薦實驗動物模型制作方法

常見自發(fā)性實驗動物模型1.免疫缺陷動物疾病模型1）B淋巴細(xì)胞缺陷疾病模型CBA/A小鼠，起源于CBA/H品系，特點是B淋巴細(xì)胞功能減退，為X-鏈隱性突變系，基因符號是Xid。臨床表現(xiàn)為免疫球蛋白缺失，細(xì)胞免疫正常。2）T淋巴細(xì)胞缺陷疾病模型裸小鼠，主要特征為無毛、裸著的、無胸腺和細(xì)胞免疫功能喪失，由于第十一對染色體上等位基因突變引起。該鼠免疫能力低，易傳染，生長不良，繁殖力低。這種動物能接受同種或異種組織移植，包括人cancer異種移植，可作為cancer免疫研究。國內(nèi)常用裸小鼠品系為BALB/Cnu/nu,Swissnu/nu和NCnu/nu等，維持費較高?，F(xiàn)也有裸大鼠、裸豚鼠等。圖片2.自發(fā)性糖尿病動物模型KK糖尿病小鼠屬先天遺傳缺陷性小鼠。該鼠對胰島素不敏感、對葡萄糖耐性小、糖尿病發(fā)病率高、老年鼠偶見肥胖。BBWistar大鼠是一種典型自發(fā)遺傳Ⅰ型（胰島素依賴性）糖尿病，發(fā)病率50-70%，臨床表現(xiàn)為多飲、多食、gao血壓、酮癥、胰島內(nèi)β-細(xì)胞大量破壞等。NIH肥胖大鼠(SHR/N-cp)是新培育的一種用于肥胖和糖尿病研究的動物模型，表現(xiàn)出與人非胰島素依賴性糖尿病相似的代謝改變。湖南實驗動物模型檢測英瀚斯生物，可承接實驗動物模型藥效實驗。

肝切除實驗動物模型造模方法：大小鼠的肝葉形狀和大小不同。因此，切除每個肺葉需要特別注意其獨特的形狀和血管位置。左外側(cè)葉很容易切除，因為它有一個狹窄的包含門靜脈和肝靜脈的蒂，并且不與下腔靜脈旁肝相連。然而，如果切除***于切除左側(cè)肝外葉（30%切除模型），則必須在肝左門區(qū)分離左側(cè)正中門靜脈和伴隨的肝動脈。

英瀚斯具備專業(yè)動物房、動物實驗室、造模操作人員，承接實驗動物模型。

由于正中葉在腔靜脈周圍有一個較寬的半基部，切除該葉需要在距腔靜脈3mm的距離處進(jìn)行幾次夾持。單純結(jié)扎肝葉的寬基部切除術(shù)有很高的風(fēng)險導(dǎo)致腔靜脈收縮和殘端肝組織損傷，因為大量結(jié)扎容易導(dǎo)致剩余肝組織變形。由于右上葉位于腔靜脈上，基部非常寬，并向背側(cè)延伸至右腔靜脈旁肝組織，因此技術(shù)上**難切除。切除需要小心地將夾鉗放置在離腔靜脈3毫米的距離處，并使用4或5條穿刺縫線，以避免損傷殘端和腔靜脈旁肝組織（圖6）。由于約70%的下腔靜脈旁組織由右上門靜脈的一個分支供應(yīng)，這種潛在的損傷可能對小的殘肝非常重要。

理想的人類疾病實驗動物模型應(yīng)該是標(biāo)準(zhǔn)化的，可重復(fù)再現(xiàn)的。應(yīng)盡量選擇標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物，也應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)化動物實驗設(shè)施內(nèi)完成，要均一性。復(fù)制的動物模型來應(yīng)該力求可真實地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種機能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，經(jīng)化驗或X光照片、心電圖、病理切片等證實。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動物，就不應(yīng)加以選用，易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。供醫(yī)學(xué)實驗研究用的動物模型，在復(fù)制時，應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開展。如雌ji素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠。因此，選用雌ji素復(fù)制大鼠和小鼠終止早期妊娠的模型是不適用的。有的動物對某致病因子特別敏感，極易死亡，也不適用。如狗腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎很快死亡（80% 24小時內(nèi)死亡），來不及做實驗醫(yī)療觀察，而且糞便劑量及細(xì)菌菌株不好控制，因此不能準(zhǔn)確重復(fù)實驗結(jié)果。英瀚斯生物，承接大鼠實驗動物模型。

實驗動物模型建模的原則。相似性，重復(fù)性，可靠性，適用性和可控性，易行性和經(jīng)濟性。在動物身上復(fù)制人類疾病模型。目的在于從中找出可以推廣（外推）應(yīng)用于病人的有關(guān)規(guī)律。外推法（Extrapolation）要冒風(fēng)險，因為動物與人到底不是一種生物。例如在動物身上無效的藥物不等于臨床無效，反之也然。因此，設(shè)計動物疾病模型的一個重要原則是，所復(fù)制的模型應(yīng)盡可能近似于人類疾病的情況。能夠找到與人類疾病相同的動物自發(fā)性疾病當(dāng)然比較好。英瀚斯生物公司 動物房、手術(shù)操作實驗室，可制作各類實驗動物模型。廣西好的實驗動物模型外包

實驗動物模型基因敲除、表性分析。云南推薦實驗動物模型制作方法

裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動物模型，它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細(xì)胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。

造模方法：

1、細(xì)胞是貼壁細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細(xì)胞傳代培養(yǎng)：當(dāng)細(xì)胞長至80-90%時，去除培養(yǎng)基，加入PBS洗1-2次，去除PBS后，加入1ml胰酶消化1-3min后，加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化，將消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。倒掉上清后，加入3ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

2、將長到培養(yǎng)皿80%-90%的細(xì)胞用胰酶消化下來，1000rpm離心，去除上清，加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞分別種在6孔板中，每孔種1×105個細(xì)胞。

3、將細(xì)胞進(jìn)行擴增培養(yǎng)，對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，將數(shù)量調(diào)整為2×107個細(xì)胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后，隨機分為3組，每組分別在右腋皮下接種2×106（100ul/只）細(xì)胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié)，每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠，取裸鼠瘤拍照凍存。 云南推薦實驗動物模型制作方法