在臨床應用中,免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學基礎對cancer進行分類很困難。如胃腸道梭形細胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細胞cancer,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預后明顯的不同,但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細胞cancer,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。免疫組化protocol,詳情請看英瀚斯生物官網(wǎng)。青海大鼠免疫組化要多久
免疫組化的DAB顯色時間如何把握?
1、DAB顯色時間不是固定的,主要由顯微鏡下控制顯色時間,到出現(xiàn)淺棕色本底時即可沖洗;
2、DAB顯色時間很短(如幾秒或幾十秒)就出現(xiàn)很深的棕褐色,這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時間過長,需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時間;
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3、此外,若很短時間就出現(xiàn)背景很深,還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全,需要延長封閉時間;
4、DAB顯色時間很長(如超過十幾分鐘)才出現(xiàn)陽性染色,一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時間過短(比較好一抗4度過夜);另一方面就是封閉時間過長。 江西組織免疫組化多少錢做免疫組化需要多少錢?
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?
1、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。
2、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。
3、組織切片本身這種抗原含量低。
4、血清封閉時間過長。
5、DAB孵育時間過短。
6、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應。
7、開始做免疫組化,建議一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等問題。
免疫組化分類中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進行介紹。一開始建立的免疫組織化學技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強、靈敏度高、快速簡便,所以在臨床病理診斷、檢驗中應用比較廣。南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎?
醫(yī)療和預后有關的免疫組化。與醫(yī)療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,表達指數(shù)越高,表明其增殖指數(shù)越活躍,惡性度增高,預后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,并能判斷預后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化的樣本保存要求是什么?河北切片免疫組化可以做什么
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免疫組化的抗原修復技術(shù)
抗原修復是免疫組化實驗中的重要步驟,目的是暴露被固定過程掩蓋的抗原表位。常用的抗原修復方法有熱修復和酶消化。免疫組化熱修復是通過加熱(如微波或高壓)使蛋白質(zhì)變性,暴露抗原表位。常用的緩沖液有檸檬酸鹽緩沖液和EDTA緩沖液。酶消化是通過蛋白酶(如胰蛋白酶)消化部分蛋白質(zhì),暴露抗原表位。免疫組化實驗中不同的抗原修復方法適用于不同的抗原和抗體,需要根據(jù)免疫組化具體實驗條件進行優(yōu)化調(diào)整。 青海大鼠免疫組化要多久