寧夏切片免疫組化推薦

免疫組化的DAB顯色時(shí)間如何把握？

1、DAB顯色時(shí)間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間，到出現(xiàn)淺棕色本底時(shí)即可沖洗；

2、DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色，這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時(shí)間過長(zhǎng)，需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時(shí)間；

英瀚斯生物病理平臺(tái)，一站式解決各種染色需求。

3、此外，若很短時(shí)間就出現(xiàn)背景很深，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全，需要延長(zhǎng)封閉時(shí)間；

4、DAB顯色時(shí)間很長(zhǎng)（如超過十幾分鐘）才出現(xiàn)陽(yáng)性染色，一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時(shí)間過短（比較好一抗4度過夜）；另一方面就是封閉時(shí)間過長(zhǎng)。 免疫組化相關(guān)知識(shí)匯總。寧夏切片免疫組化推薦

免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷，英瀚斯生物為您介紹。對(duì)于反應(yīng)性增生還是cancer性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測(cè)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別。在濾泡反應(yīng)性增生時(shí)，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2)，bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中，由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá)，bcl-2陽(yáng)性。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)，周期素(Cycling)，核抗原(Ki-67)通過對(duì)cancer細(xì)胞增生的程度作出評(píng)價(jià)，從而提示增生細(xì)胞的良惡性。四川小鼠免疫組化價(jià)格免疫組化結(jié)果怎么看？

免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹：

英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟：

1、SP三步法

1）石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。

2）0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內(nèi)源性過氧化物酶活性。

3）蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘

4）候選步驟：采用抗原修復(fù)：微波（建議30分鐘內(nèi)4次中火）、高壓、酶修復(fù)方法。自然冷卻，再用3分鐘×3次.

5）血清封閉：室溫15-30分鐘，盡可能與二抗來源一致。傾去，勿洗。

6）滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過夜（比較好復(fù)溫）。PBS沖洗，3分鐘×5次。

7）滴加生物素標(biāo)記的二抗，室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

8）PBS沖洗，3分鐘×5次。

9）滴加SP（鏈霉親和素-過氧化物酶），室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

10）PBS沖洗，3分鐘×5次。

11）顯色劑顯色（DAB等）。

12）自來水充分沖洗。

13）可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。

14）選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色？ 

（1）縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。

（2）一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。

（3）內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細(xì)胞多的組織），需要通過延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來降低背景染色； 

做病理染色，就找英瀚斯，專業(yè)團(tuán)隊(duì)支持。

（4）非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過延長(zhǎng)二抗來源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果； 

（5）縮短DAB孵育時(shí)間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等； 

（6）適當(dāng)增加PBS沖洗次數(shù)和浸洗時(shí)間，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要； 

（7）防止標(biāo)本染色過程中出現(xiàn)干片，這容易增強(qiáng)非特異性著色。 在南京英瀚斯做的免疫組化，效果不錯(cuò)！

免疫組化的質(zhì)量控制免疫組化的質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性和重復(fù)性的關(guān)鍵步驟。質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前的抗體驗(yàn)證、實(shí)驗(yàn)中的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，以及實(shí)驗(yàn)后的結(jié)果評(píng)估?？贵w驗(yàn)證是通過Western blot或免疫熒光等方法驗(yàn)證抗體的特異性和靈敏度。陽(yáng)性對(duì)照是使用已知表達(dá)目標(biāo)蛋白的組織或細(xì)胞，確保實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的有效性。陰性對(duì)照是使用不表達(dá)目標(biāo)蛋白的組織或細(xì)胞，排除非特異性結(jié)合。結(jié)果評(píng)估是通過圖像分析軟件對(duì)顯色結(jié)果進(jìn)行定量評(píng)估，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。免疫組化結(jié)果分析是什么？江蘇大鼠免疫組化外包

英瀚斯生物為您詳解免疫組化實(shí)驗(yàn)指南！寧夏切片免疫組化推薦

確定cancer分期，免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦，英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)，與是否浸潤(rùn)、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān)，而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤(rùn)、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分，用于區(qū)分原位*和浸潤(rùn)*，一旦上皮性*突破基膜為浸潤(rùn)，未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對(duì)血管或淋巴管的浸潤(rùn)。因此對(duì)許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤(rùn)，免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。寧夏切片免疫組化推薦