通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄...
本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個的增殖細(xì)胞,同時也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方?江蘇口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商細(xì)胞增殖&細(xì)胞計數(shù)檢測細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基...
現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見,在細(xì)胞增殖時能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度EdU細(xì)胞增...
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準(zhǔn)備)。抗體的使用量通過預(yù)實(shí)驗后進(jìn)行確認(rèn),原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品(盡量提供)。4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。注:若要檢測磷酸化蛋白,請在2-3個月內(nèi)進(jìn)行,因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實(shí)驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預(yù)實(shí)驗采取3個一抗稀釋度,選取部分實(shí)驗樣本。2、正式實(shí)驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整實(shí)驗報告。六、服務(wù)項目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)...
細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān),比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等,但是檢測細(xì)胞增殖現(xiàn)象的直接準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的合成,這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒前的安全檢查。江西提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好使用本試劑盒所做結(jié)果可以...
細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān),比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等,但是檢測細(xì)胞增殖現(xiàn)象的直接準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的合成,這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度上海東寰告訴您什么是EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒?湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測和B...
EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗。與BrdU檢...
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢?天津哪家公司提供E...
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準(zhǔn)備)??贵w的使用量通過預(yù)實(shí)驗后進(jìn)行確認(rèn),原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品(盡量提供)。4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。注:若要檢測磷酸化蛋白,請在2-3個月內(nèi)進(jìn)行,因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實(shí)驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預(yù)實(shí)驗采取3個一抗稀釋度,選取部分實(shí)驗樣本。2、正式實(shí)驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整實(shí)驗報告。六、服務(wù)項目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)...
EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU檢測法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項。山東如何使用E...
本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測,可以檢測50個樣品,每個樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液;如果用于96孔板檢測,可以檢測500個樣品,每個樣品的檢測體系為50μl的Click反應(yīng)液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測,分別可以檢測125、250、350和1250個樣品,每個樣品推薦的Click反應(yīng)液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測,可以檢測125-250個樣品,每個樣品的反應(yīng)體系為100-200μl的Click反應(yīng)液。大包裝C0085L可檢測樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。上海...
上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn):安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處。北京哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、...
EdU細(xì)胞增殖檢測和BrdU細(xì)胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性,就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析,該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對的影響,因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時,然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細(xì)胞增殖活性,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0...
EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方?山東正規(guī)EdU細(xì)胞增...
細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。你知道EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的特點(diǎn)嗎?湖北品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢保存條件:-20℃保存...
蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務(wù)WesternBlotting技術(shù)服務(wù)(DH1004)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提?。簭娜嘶騽游锛?xì)胞、組織,細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉(zhuǎn)印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用)。5、預(yù)實(shí)驗及正式實(shí)驗服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞>1×10^7;組織>30mg;細(xì)菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量...
EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它,并且對細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時,Click-iTEdU和InvitrogenCl...
EdU細(xì)胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,以檢測細(xì)胞其他性狀特征。該方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。湖南品牌EdU...
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需...
保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項:由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會凝固,使用前請室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色,需避光保存,長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以2...
EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測,就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。福建...
EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗。與BrdU檢...
快速—–無需過夜,省卻抗原抗體反應(yīng)。整個檢測過程只需2.5小時,縮短實(shí)驗周期。準(zhǔn)確—–標(biāo)記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完。靈敏—–無需抗體,檢測染料為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測。兼容—–對樣品幾乎無損傷,允許與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征。本試劑盒適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也適用于組織切片,可以檢測到細(xì)胞或組織樣本中的單個增殖細(xì)胞,也可以對細(xì)胞或組織樣本總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量分析。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題?河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試...
EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。EdU細(xì)胞增殖...
細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢?江西品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格EdU細(xì)胞增殖檢測試...
搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液,加入300ulTrito...
注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)孵育時間至少2小時,可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進(jìn)行細(xì)胞固定;2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來配置,避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入30...
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需...
磺酰羅丹明B細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合,在490nm~520nm波長處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù),可用做細(xì)胞數(shù)的定量。儲存條件:2-8℃避光保存。有效期:一年。注意事項:●本試劑盒供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或?!窠古c其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果?!癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?!癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸?!裾綄?shí)驗前,建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量,在1000-10...
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準(zhǔn)備)??贵w的使用量通過預(yù)實(shí)驗后進(jìn)行確認(rèn),原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品(盡量提供)。4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。注:若要檢測磷酸化蛋白,請在2-3個月內(nèi)進(jìn)行,因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實(shí)驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預(yù)實(shí)驗采取3個一抗稀釋度,選取部分實(shí)驗樣本。2、正式實(shí)驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整實(shí)驗報告。六、服務(wù)項目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)...