《數(shù)字化轉(zhuǎn)型和跨學(xué)科實(shí)踐暑期研討會(huì)》詳解
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細(xì)胞培養(yǎng)中胎牛血清的重要作用:許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng),在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,血清無(wú)疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是更為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,其中含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì),多肽類,元素類,其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。胎牛血清:母牛懷孕3-8個(gè)月時(shí),采用剖腹心臟密閉穿刺取血。興化Biochannel胎牛血清
胎牛血清使用中的常見(jiàn)問(wèn)題:血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?國(guó)內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是更好的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國(guó)外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來(lái)說(shuō)這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國(guó)產(chǎn)的就夠用了。此外,由于國(guó)內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒(méi)有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買(mǎi),而代理商又魚(yú)龍混雜,所以買(mǎi)到假貨的可能性也很大。海安Bouin's固定液胎牛血清經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)驗(yàn)證。
胎牛血清作為細(xì)胞生長(zhǎng)不可缺少的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源一直備受科研人員重視,那么胎牛血清在參與細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)都發(fā)揮著什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、元素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能:提供維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的元素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
使用胎牛血清的注意事項(xiàng):注意解凍的方法,再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來(lái),便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外更好采用分步解凍的方式解凍血清,即先利用冰箱或冷庫(kù)將其溶解滿幾天,之后在室溫下全溶后再進(jìn)行分裝。胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來(lái)加熱已經(jīng)完全解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過(guò)程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過(guò)胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求,客戶可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成分雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、元素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的元素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。需要長(zhǎng)期保存的胎牛血清須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。太倉(cāng)Bouin's固定液
胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。興化Biochannel胎牛血清
如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過(guò)夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動(dòng)使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會(huì)嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲(chǔ)存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過(guò)37°C時(shí)會(huì)降解營(yíng)養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時(shí)存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運(yùn)輸,到達(dá)時(shí)應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運(yùn)輸時(shí)間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進(jìn)行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開(kāi)封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。興化Biochannel胎牛血清
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