細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總
一般拿到細胞后，應該注意什么?
收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。
何時須更換培養(yǎng)基?
視細胞生長密度而定，常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。
細胞何時進行傳代較好?
一般情況下細胞生長至完全匯合后就應該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細胞，在匯合前就必須進行傳代，這類細胞一般在密度70-80%就進行傳代，否則會引起細胞分化。 全自動細胞計數(shù)儀的壽命。天津微型細胞計數(shù)儀價目表
眾所周知，活細胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細胞系生長狀態(tài)的重要指標。生物制藥研發(fā)人員進行懸浮細胞培養(yǎng)，每天所不能避免的工作，就是取樣計數(shù)。使用細胞計數(shù)板進行人工計數(shù)無疑是金標準方法。
但這個傳統(tǒng)方法其勞動強度十分驚人，樣品量少的時候還能吃得消，樣品量大一些，甚至于要做大規(guī)模的DOE實驗時，估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數(shù)有較強的主觀性，對操作人員的經(jīng)驗及操作熟練度有一定要求，導致有時候數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可比性會受到質疑。
拓開細胞計數(shù)儀，擁有自動化，合規(guī)化，高通量等優(yōu)勢，能夠幫助您在實驗室里高效率，高標準的完成細胞計數(shù)和細胞檢測等工作，是您細胞科研領域的強力伙伴。 山西細胞計數(shù)儀價目表細胞計數(shù)儀有那些廠商？
臺盼藍染液是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性。細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA結合，使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內。故可以檢測細胞是否存活。
臺盼藍染色法的原理正常的活細胞，胞膜結構完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。
如何讓細胞計數(shù)更加準確
對于每種細胞計數(shù)方法，樣品表面必須是干凈的。任何污染都可能導致不準確的結果。對于人工細胞計數(shù)，這包括移除和清潔玻璃蓋片，然后用70%乙醇然后用水清潔計數(shù)腔。當使用一次性塑料載玻片時，每個樣品都需要一個新的載玻片(如果載玻片有兩個分開的腔室，則需要一對樣品)。
加載樣本前需要旋渦震蕩
在裝載樣品之前立即進行漩渦震蕩處理，是確保被分析樣品具有代表性的重要步驟。
不同大小和類型的細胞將以不同的速率沉降和聚集。在加載樣品之前立即旋轉溶液會增加等分的概率，并準確地反映細胞培養(yǎng)的特性。 細胞計數(shù)儀的使用難度。
一般拿到細胞后，應該注意什么？
收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張），排除細胞本身污染的情況。
拓開細胞計數(shù)儀，擁有自動化，合規(guī)化，高通量等優(yōu)勢，能夠幫助您在實驗室里高效率，高標準的完成細胞計數(shù)和細胞檢測等工作，是您細胞科研領域的強力伙伴。 全自動細胞計數(shù)儀的評價。湖南細胞計數(shù)儀代理商
細胞計數(shù)儀的實用性對比。天津微型細胞計數(shù)儀價目表
細胞內有空泡，是否是正?，F(xiàn)象?
部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等)，這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較高，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。
細胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因
很可能是培養(yǎng)體系不適合細胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過度，對細胞有嚴重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細胞，傳代太稀;或者生長較快的細胞，傳代較密，細胞嚴重堆疊生長)。 天津微型細胞計數(shù)儀價目表
上海拓開生物科技有限公司專注技術創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā)，發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大。公司目前擁有較多的高技術人才，以不斷增強企業(yè)重點競爭力，加快企業(yè)技術創(chuàng)新，實現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營。上海拓開生物科技有限公司主營業(yè)務涵蓋葡萄糖乳酸分析儀，生化分析儀，智能控制系統(tǒng)，細胞計數(shù)儀，堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針，贏得廣大客戶的支持和信賴。公司深耕葡萄糖乳酸分析儀，生化分析儀，智能控制系統(tǒng)，細胞計數(shù)儀，正積蓄著更大的能量，向更廣闊的空間、更寬泛的領域拓展。