中藥藥物評價研究

正常成人的心率在每分鐘60～100次之間，如果低于60次稱為心動過緩，是心律失常的一個重要類型，患者平時有頭暈、乏力、倦怠、精神差的癥狀。研究表明，斑馬魚心血管系統(tǒng)的發(fā)育與人高度相似，雖然斑馬魚是單心房單心室，但其心臟結構及功能與人高度保守。同時，由于斑馬魚具有透明易觀察等優(yōu)點，開始被大量應用于心血管疾病研究和藥物心血管毒性評價當中。維拉帕米能阻滯心肌細胞慢通道，抑制Ca2+向細胞的內流，阻礙心臟慢反應電活動，降低舒張期去極化速度，抑制竇房結的自律性，減慢心率；亦能延長房室結的有效不應期，減慢房室傳導。用解剖顯微鏡下觀察斑馬魚心率，模型對照組斑馬魚心率較正常斑馬魚明顯減慢。利用斑馬魚模型評價酒精性肝損傷保護作用。中藥藥物評價研究

藥物開發(fā)理論上是一個有邏輯、有步驟的過程，在這一過程中，早期小規(guī)模研究的信息用于支持規(guī)模更大、目的性更強的后續(xù)研究。因此各期臨床研究的目的是不盡相同的。I期臨床試驗I期臨床試驗是初步的臨床藥理學及人體安全性評價試驗。目的：I期臨床中耐受性試驗目的是對新藥的人體初步安全性進行評價，是評價人體對藥物的耐受性、了解藥物動力學及藥效學分類、藥物代謝和藥物相互作用的研究、評估藥物活性。內容：為達到以上目的，就需要進行劑量——耐受性研究（即初試劑量和耐受性評估），單劑量、多劑量的藥物動力學和/或藥效學研究，藥物相互作用研究。藥理學研究方法藥物臨床前研究實驗。

蛋黃粉中60%為脂類，用蛋黃粉喂食斑馬魚，可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高，從而建立斑馬魚血脂高癥模型。經過油紅O特異性脂肪染色（與組織內甘油三酯等脂肪滴結合呈橘紅色），血脂高斑馬魚血管內肉眼可見明顯的脂質聚積，通過靜脈注射，可見熒光標記膽固醇的積累。我們評價斑馬魚降低血脂功效有4個指標：1.斑馬魚血脂表型圖；2.斑馬魚總甘油三脂含量；3.斑馬魚膽固醇表型圖；4.斑馬魚總膽固醇含量。1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用降脂產品組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少。2.本實驗證實了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀類降脂產品具有明顯的降脂降膽固醇作用。

我們先將測試斑馬魚喂食蛋黃粉和熒光標記的膽固醇（蛋黃粉和熒光標記的膽固醇通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內），建立血脂高模型后，再將受測試斑馬魚分成兩組，分別是模型對照組和服用降脂劑組，服用降脂組攝入阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀之類的降脂劑。服用一段時間降脂劑后，我們對斑馬魚整體做脂肪特異性染色，觀察體內甘油三酯聚積的變化，以及觀察體內膽固醇的聚積情況，同時利用甘油三酯和膽固醇試劑盒檢測斑馬魚體內甘油三酯和膽固醇含量的變化。利用斑馬魚模型評價改善貧血功效。

靜脈注射給予長春瑞濱造模斑馬魚抵抗力低下模型。大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯，導致血小板、紅細胞及白細胞數目（中性粒細胞、巨噬細胞、T細胞等）減少和貧血，導致抵抗力低下。人類與斑馬魚在免疫系統(tǒng)的細胞組成上極為相似，而且斑馬魚是目前所有同時具有特異性免疫和非特異性免疫動物個體中體積較小的，適合高通量評價調節(jié)免疫功效。斑馬魚靜脈注射大劑量長春瑞濱后可造成免疫低下。采用轉基因T細胞紅色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到抵抗力低下的斑馬魚體內的T細胞熒光強度明顯減弱利用斑馬魚模型評價軟骨修復功效。藥品不良反應質量評價

斑馬魚模型評價眼毒性。中藥藥物評價研究

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和抗結腸炎藥物組。其中正常對照組未攝入TNBS，模型對照組與抗結腸炎藥物組都加入了等量的TNBS（TNBS通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）?？菇Y腸炎藥物組在攝入TNBS的同時攝入潑尼松之類抗結腸炎藥物。服用一段時間抗結腸炎藥物組后，我們觀察斑馬魚的腸腔面積變化、杯狀細胞數量。可以看到，服用抗結腸炎藥物的腸腔面積與未加TNBS的正常對照組比較相似，沒有明顯的腸腔面積擴大。中藥藥物評價研究

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