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對于大多數(shù)哺乳類動物細(xì)胞,滲透壓在260~320mOsm/kg的范圍內(nèi)都適宜。在生產(chǎn)、配制細(xì)胞培養(yǎng)基的過程中,滲透壓的測定較為重要,有助于防止在生產(chǎn)、配制過程中出現(xiàn)稱量等方面的錯誤。反應(yīng)器高密度培養(yǎng)動物細(xì)胞過程,在添加碳酸氫鈉的過程中注意滲透壓的監(jiān)控,防止?jié)B透壓過高對細(xì)胞的損害。溫度溫度對細(xì)胞培養(yǎng)基有較大的影響,溫度過高可引起營養(yǎng)成份的降解或破壞,細(xì)胞培養(yǎng)基的pH、離子強(qiáng)度和電解常數(shù)pKa也可能受到影響。如細(xì)胞培養(yǎng)液中的谷氨酰胺,在高溫條件下降解的速度較快,如35℃貯存時,放置3天降解25%左右,在4℃貯存3周降解約20%。粘滯性及表面張力含血清細(xì)胞培養(yǎng)液的粘滯性主要是由血清引起的,在轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)貼壁細(xì)胞時,培養(yǎng)液的粘滯性對細(xì)胞生長沒有多大影響;但在生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)細(xì)胞時,細(xì)胞培養(yǎng)液的粘滯性則直接影響攪拌轉(zhuǎn)速控制及攪拌剪切力對細(xì)胞造成的損傷程度。表面張力對細(xì)胞培養(yǎng)有較大的作用,尤其在利用生物反應(yīng)器進(jìn)行懸浮培養(yǎng)時,攪拌和通氣都會引起泡沫的產(chǎn)生。對于含血清培養(yǎng)液,由于血清中多種蛋白的存在,攪拌時產(chǎn)生的氣泡較多,氣泡的上升運(yùn)動對細(xì)胞的損傷程度還有爭議,但氣泡的破裂對細(xì)胞有明顯的損傷作用。為降低這種損傷。減血清培養(yǎng)基提高了實驗的可重復(fù)性。廣東RPMI1640培養(yǎng)基市場報價
7)溶液應(yīng)在2℃-8℃下避光保存。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書。2)配制可高壓**細(xì)胞培養(yǎng)基(1)根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下,并入容器。加注射用水至總體積的95%,輕微攪拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分鐘。(3)待溶液冷卻至室溫,加入無菌mol/LL-谷氨酰胺溶液規(guī)定體積、無菌%(w/v)碳酸氫鈉溶液規(guī)定體積,加注射用水(20℃~30℃)至規(guī)定體積,混勻。(4)如果必要,用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。(5)溶液應(yīng)在2℃-8℃下避光保存。具體使用方法參照培養(yǎng)基包裝袋上的說明書。注意事項1)細(xì)胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,醫(yī)*生產(chǎn)上一般為注射用水。2)建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán)。3)溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90%-95%的培養(yǎng)用水,添加劑加完后再補(bǔ)足。4)如需添加的組分較多時,某一組分完全溶解后,再添加另一組分。5)待培養(yǎng)基完全溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產(chǎn)生沉淀。6)所有成分完全溶解后,培養(yǎng)基應(yīng)立即過濾或高壓**,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。7)在過濾**時。廣東RPMI1640培養(yǎng)基市場報價無酚紅培養(yǎng)基適用于對酚紅敏感的實驗。
但其引入的尿素和**銨成分含量過高,這對多種植物生長不利;cna一種植物**培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基及cna一種無nh4no3植物**培養(yǎng)用培養(yǎng)基分別公開了一種無硝酸培養(yǎng)基,獲得較好的培養(yǎng)效果,但新引入的硝酸鈣和硝酸鎂兩種成分均為易制爆試劑;cna一種植物組培**培養(yǎng)基公開了一種無硝酸銨培養(yǎng)基,可提高植物組培成功率,但引入了易制爆試劑硝酸鈉,且其*適用于植物離體培養(yǎng),不具有通用性。此外,現(xiàn)有的植物**培養(yǎng)基,包括ms、b5、n6以及其他公開的植物**培養(yǎng)基,它們被用于配制液體培養(yǎng)基時的ph值波動大,在用于植物水培時均需要調(diào)節(jié)ph,過程繁瑣,耗費(fèi)時間。因此,急需一種既無硝酸銨、也不引入新的易制爆成分,并且培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當(dāng)或優(yōu)于ms培養(yǎng)基的***適用于多種植物**培養(yǎng)的ph穩(wěn)定型培養(yǎng)基。技術(shù)實現(xiàn)要素:有鑒于此,本發(fā)明的目的是提供一種在不額外引入易制爆成分的前提下,去除了市場禁止流通的易制爆成分nh4no3,且ph穩(wěn)定的***適用于多種植物**培養(yǎng)的植物基本培養(yǎng)基,以解決現(xiàn)有植物**培養(yǎng)基存在的技術(shù)問題。本發(fā)明廣適性植物**培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno32662mg、。
1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為8個。如圖4所示。對比培養(yǎng)例4:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例4,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為6個。如圖4所示。培養(yǎng)實例4和對比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)16d時,與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,其莖高、莖中粗、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基。如圖4所示。培養(yǎng)實例5:哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)(1)擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。(2)擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+2,,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營養(yǎng)成分。
若應(yīng)用于植物培養(yǎng)中的液體培養(yǎng)基制作,可不用調(diào)節(jié)ph,用超純水(ph為)充分溶解后定容,便可直接應(yīng)用于大多數(shù)植物水培。培養(yǎng)實例1:哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)(1)種子保存及消毒方法:a、擬南芥種子保存方法:哥倫比亞(col,columbia)型擬南芥種子成熟后,收取種子于,加入3-8顆變色**干燥劑,用封口膜密封后置于4℃長期保存;b、擬南芥種子**消毒方法:取出經(jīng)低溫干燥保存的種子,于無菌環(huán)境下,將適量種子置于無菌,加入適量體積的無菌水,將離心管顛倒幾次后用低速離心機(jī)離心10s,小心倒掉上清,重復(fù)3次;加入75%酒精,將離心管顛倒幾次后用低速離心機(jī)離心10s,小心倒掉上清;用無菌水清洗3次,低速離心10s后去除上清;加入適量體積的5%naclo溶液,將離心管上下顛倒10-20次,低速離心10s后倒掉上清,重復(fù)2次;用無菌水清洗3次,低速離心10s后去除上清;加入無菌水,使種子完全浸泡在無菌水中,于4℃放置48h后播種。在種子質(zhì)量良好的情況下,利用上述方法保存及消毒的無菌擬南芥種子,萌發(fā)率極高且?guī)缀跬瑫r出苗。(2)生長培養(yǎng)基配制:1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l,用超純水溶解,。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。DMEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實驗研究。廣東RPMI1640培養(yǎng)基市場報價
使用減血清培養(yǎng)基可以減少細(xì)胞培養(yǎng)中的血清干擾因素。廣東RPMI1640培養(yǎng)基市場報價
本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。背景技術(shù):繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球?qū)俾淙~灌木,別名八仙花、**花、粉團(tuán)花、雪球花、草繡球等,是園林上應(yīng)用***的觀賞植物。原產(chǎn)于我國長江流域及以南,自然株高2m。葉對生,倒卵或橢圓形,邊緣有鋸齒,傘房花序頂生,直徑20cm,近球形?;ㄉ嘧儯喟咨?,漸轉(zhuǎn)粉紅色,再轉(zhuǎn)紫紅色,花色美艷。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4~6時,花色多呈藍(lán)色;ph值,則呈紅色。繡球花葉片翠綠,花色鮮艷,盛開時花團(tuán)錦簇,美麗多姿,每簇花可開2個月之久,觀賞期長。由于繡球花的孕性花極為少數(shù),所以不易結(jié)種,常用分株、壓條或扦插方法繁殖,但分株、壓條繁殖倍率低,速度慢,而扦插繁殖又會受到季節(jié)的限制,不能常年生產(chǎn)苗木,很難滿足市場的需求。技術(shù)實現(xiàn)要素:針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足,本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短,效率高,成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的:一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,具體步驟如下:s1:外植體選擇;s2:外植體消毒;s3:誘導(dǎo)培養(yǎng);s4:增殖培養(yǎng);s5:生根培養(yǎng),其中。廣東RPMI1640培養(yǎng)基市場報價