河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-27

    所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。基于本申請(qǐng)中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液;整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過程中,控制發(fā)酵溫度35℃,通風(fēng)比1∶,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,溶氧維持在20%。無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)

河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo),培養(yǎng)基

    如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營養(yǎng)以維持細(xì)胞的生長,對(duì)每個(gè)培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)方式、細(xì)胞種類的不同而存在差異。細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長的液體環(huán)境,一般指完全培養(yǎng)液,添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來說是需要的,因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長所需要的全部營養(yǎng),如MEM培養(yǎng)基,較為常用的量為5%~10%的比例,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用,但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用,以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏(Hanks’BSS)或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般為5‰濃度),即成乳漢(歐)液,再與化學(xué)合成培養(yǎng)基(一般為MEM)按比例混合使用(如1:1)。細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑(生長因子等)模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,包括蛋白質(zhì)、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、**酸及脂類等。湖南無血清培養(yǎng)基一般多少錢減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中血清帶來的變異性。

河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo),培養(yǎng)基

    培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基使用說明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見過一些實(shí)驗(yàn)室,不經(jīng)加熱直接高壓**,也有的實(shí)驗(yàn)室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對(duì)檢測結(jié)果有沒有影響?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備后應(yīng)保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調(diào)PH值C、過濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬【求助】培養(yǎng)基制備請(qǐng)問牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區(qū)別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基的制備方法以下為常規(guī)方法,如配方中有特殊規(guī)定或要求,以配方為***依據(jù)。1.根據(jù)配方,計(jì)算各種營養(yǎng)成分用量。一般*品可用普通*物天平稱量,用量少的*品,可按比例配成高濃度溶液,再按所需量用移液管吸取。稱好的*品放入品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬-50萬【求助】培養(yǎng)基制備系統(tǒng)哪位大蝦有關(guān)于培養(yǎng)基制備系統(tǒng)相關(guān)的資料,原理、應(yīng)用、品牌、技術(shù)對(duì)比等越詳細(xì)越好。

    文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對(duì)谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請(qǐng)人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請(qǐng)人針對(duì)微生物發(fā)酵的特點(diǎn),繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羥基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,尿素,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。減血清培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo),培養(yǎng)基

    1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為8個(gè)。如圖4所示。對(duì)比培養(yǎng)例4:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實(shí)例4,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為6個(gè)。如圖4所示。培養(yǎng)實(shí)例4和對(duì)比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)16d時(shí),與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢(shì)更佳,其莖高、莖中粗、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基。如圖4所示。培養(yǎng)實(shí)例5:哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)(1)擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。(2)擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+2,,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。無酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。湖南無血清培養(yǎng)基一般多少錢

使用減血清培養(yǎng)基可以減少細(xì)胞培養(yǎng)中的血清干擾因素。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)

    本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖,a:水稻成熟胚愈傷**;b:水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率;a中bar=;圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖;圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長狀況的比較效果圖,a:不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無菌苗生長情況;b1、c1和d1:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b2、c2和d2:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b3、c3和d3:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b4、c4和d4:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b5、c5和d5:1/;b6、c6和d6:1/;b7、c7和d7:;b8、c8和d8:;a、b、c和d中bar=;圖10是對(duì)在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的比較效果圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例一,本實(shí)施例廣適性植物**培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno32662mg、。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)