實(shí)時(shí)熒光定量PCR法常用的方法有兩種:第一種是SYBRGreen熒光染色定量PCR法;第二種是TaqMan熒光探針定量PCR法。這兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),在實(shí)驗(yàn)中要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求來(lái)選擇用那種方法。而對(duì)于宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)來(lái)講,TaqMan熒光探針定量PCR法比SYBRGreen熒光染色定量PCR法靈敏度更高,穩(wěn)定性更好,所以在生物制藥領(lǐng)域領(lǐng)域更多的客戶會(huì)選擇用TaqMan熒光探針定量PCR法來(lái)檢測(cè)樣本中的宿主細(xì)胞殘留DNA的量。定量PCR法用于宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)的原理是:定量PCR法也稱實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(qPCR法)是在普通PCR的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的,在PCR反應(yīng)體系中加入可實(shí)時(shí)反映特異性擴(kuò)增產(chǎn)物量變化的熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,因此稱為熒光定量PCR,也稱為real-timePCR。病毒性疫苗生物制品中宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)的必要性。上海質(zhì)粒殘留DNA檢測(cè)特點(diǎn)
南京正揚(yáng)生物科技有限公司的HEK293細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑盒,基于TaqMan熒光探針?lè)╭PCR原理,可用于各種生物制品及藥品中間品、半成品和成品中來(lái)自于HEK293細(xì)胞的宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè),比較低檢測(cè)限可達(dá)到fg級(jí)別。具有檢測(cè)快速、特異性強(qiáng)、檢測(cè)靈敏度高、可防止氣溶膠污染、重復(fù)性好、回收率穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。本公司試劑盒質(zhì)控嚴(yán)格,可給終端客戶提供完整的性能驗(yàn)證報(bào)告,以供客戶進(jìn)行各種項(xiàng)目申報(bào)。且本公司提供售前售后服務(wù),幫助客戶解決實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題,全程助力客戶順利完成實(shí)驗(yàn)。南京E1A殘留DNA檢測(cè)試劑盒大腸桿菌宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑盒可檢測(cè)生物制品中大腸桿菌的殘留DNA。
在做宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)的時(shí)候肯能會(huì)出現(xiàn)BLK或是NCS(陰性對(duì)照)異常起跳的現(xiàn)象,但是我們通過(guò)查看多組分圖發(fā)現(xiàn)BLK或NCS(陰性對(duì)照)并沒(méi)有起跳,那么這種情況是什么原因?qū)е碌哪??首先我們通過(guò)多組分圖已經(jīng)確認(rèn)BLK和NCS是沒(méi)有起跳的,這就說(shuō)明實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)是沒(méi)有出現(xiàn)問(wèn)題的,問(wèn)題出在數(shù)據(jù)分析環(huán)節(jié),此時(shí)可以通過(guò)查看擴(kuò)增曲線確認(rèn)在擴(kuò)增前期熒光信號(hào)有無(wú)過(guò)大的波動(dòng),前期有過(guò)大的信號(hào)波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致自動(dòng)基線計(jì)算出現(xiàn)錯(cuò)誤,所以會(huì)導(dǎo)致BLK和NCS出現(xiàn)異常起跳現(xiàn)象。我們只需要手動(dòng)調(diào)整基線避開熒光信號(hào)波動(dòng)再進(jìn)行數(shù)據(jù)分析就可以了。
南京正揚(yáng)生物科技有限公司的E.coli殘留DNA檢測(cè)試劑盒,基于TaqMan熒光探針?lè)╭PCR原理,可用于各種生物制品及藥品中間品、半成品和成品中來(lái)自于E.coli的宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè),比較低檢測(cè)限可達(dá)到fg級(jí)別。具有檢測(cè)快速、特異性強(qiáng)、檢測(cè)靈敏度高、可防止氣溶膠污染、重復(fù)性好、回收率穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。本公司試劑盒質(zhì)控嚴(yán)格,可給終端客戶提供完整的性能驗(yàn)證報(bào)告,以供客戶進(jìn)行各種項(xiàng)目申報(bào)。且本公司提供售前售后服務(wù),幫助客戶解決實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題,全程助力客戶順利完成實(shí)驗(yàn)。Vero宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑盒可檢測(cè)生物制品中Vero細(xì)胞的殘留DNA。
南京正揚(yáng)生物科技有限公司的宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑中的提取試劑盒可處理各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的宿主細(xì)胞DNA。組分簡(jiǎn)單無(wú)需額外配置用于提取實(shí)驗(yàn)的試劑;消化時(shí)間短整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程耗時(shí)少;由于操作步驟簡(jiǎn)單便捷且無(wú)需額外配置實(shí)驗(yàn)試劑,所以在提取中受實(shí)驗(yàn)操作的影響較小。南京正揚(yáng)生物科技有限公司的宿主細(xì)胞殘留DNA提取試劑盒采用的磁珠法提取樣本中的DNA,可處理多種復(fù)雜樣本可提取樣本中微量的DNA;提取效率更加穩(wěn)定,提取的均一性好,可重復(fù)性高。宿主細(xì)胞殘留DNA是影響生物制品安全性的關(guān)鍵因素之一,各國(guó)都對(duì)宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)做出了具體要求。鄭州CHO細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)優(yōu)缺點(diǎn)
生物藥物工藝相關(guān)雜質(zhì)檢測(cè)之一:宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)。上海質(zhì)粒殘留DNA檢測(cè)特點(diǎn)
宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中BLK無(wú)模板對(duì)照結(jié)果異常出現(xiàn)的原因及解決辦法?BLK無(wú)模板對(duì)照的作用是用來(lái)評(píng)定本次實(shí)驗(yàn)加樣環(huán)節(jié)是否發(fā)生了污染;如果BLK無(wú)模板發(fā)生起跳即有Ct值,就說(shuō)明在本次實(shí)驗(yàn)的加樣環(huán)節(jié)中發(fā)生了污染。一般的解決方式為用核酸清除劑噴灑擦拭qPCR樣品加樣區(qū)和加樣時(shí)用到的實(shí)驗(yàn)儀器***污染,然后在qPCR加樣區(qū)直接用超純水或者DNA稀釋液作為樣本直接加樣上機(jī)檢測(cè),根據(jù)結(jié)果判斷污染是否排除。在做宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候加標(biāo)對(duì)照組是必須要做的一個(gè)對(duì)照組,其對(duì)數(shù)據(jù)分析起著至關(guān)重要的作用,但是我們要怎么確定加標(biāo)量的多少呢?首先對(duì)于樣品加標(biāo)來(lái)講加標(biāo)量的設(shè)置要根據(jù)樣品中宿主細(xì)胞殘留DNA的濃度來(lái)確定,一般加標(biāo)的量是樣品中宿主細(xì)胞殘留DNA量的5-1O倍,使加標(biāo)樣品與樣品的Ct值>1,要避免因PCR波動(dòng)性導(dǎo)致回收率不合格的情況。其次對(duì)于空白加標(biāo)來(lái)講,只需要保持與樣品加標(biāo)的加標(biāo)量保持一直就可以了。上海質(zhì)粒殘留DNA檢測(cè)特點(diǎn)