天津口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-27

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒直接測定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測的準(zhǔn)確方法之一開發(fā)的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇,也可以用于培養(yǎng)細(xì)胞分析及組織切片分析EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。天津口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒穩(wěn)定:適用于對細(xì)胞增殖狀況的連續(xù)觀察●經(jīng)濟(jì):無需裂解細(xì)胞,細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)或用于其他實(shí)驗(yàn)●可靠:文獻(xiàn)引用率高,Pubmed有上千篇文獻(xiàn)的引用AlamarBlue®的應(yīng)用●監(jiān)測細(xì)胞的生長增殖狀態(tài)、研究細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡●監(jiān)測生長因子活性,評估生長因子對細(xì)胞增殖的影響●物尤其是藥物的開發(fā)●環(huán)境污染物質(zhì)的評估,細(xì)胞毒分析●效價(jià)評估細(xì)胞增殖過程中,細(xì)胞體內(nèi)的環(huán)境由氧化環(huán)境變化成還原環(huán)境,呼吸鏈中的NADPH/NADP,FADH/FAD,FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin(刃天青)是一種無毒、可透膜的藍(lán)色染料,有微弱的熒光性上海咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。

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EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測周期單需2.5小時(shí);更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測細(xì)胞其他性狀特征。

這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高,通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?

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試劑盒以外自備試劑和儀器:●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標(biāo)儀使用方法:使用注意事項(xiàng):●接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻,以避免細(xì)胞沉淀下來,導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等,可以每接種幾個(gè)孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā),為了減少誤差,建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基,而不作為指標(biāo)檢測孔?!衽囵B(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異。●用水或乙酸洗細(xì)胞時(shí)充滿孔后保持一會(huì)倒掉即可,也可以用排或洗板機(jī)。●OD值在1-2之間較好。以96孔板為例:1.取出培養(yǎng)好待測的96孔板。2.在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細(xì)胞加100μl固定液),靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時(shí)。(貼壁細(xì)胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液;懸浮細(xì)胞必須直接加入固定液,輕加在培養(yǎng)液面,靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時(shí),可使懸浮細(xì)胞固定在培養(yǎng)孔底部)。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在哪?安徽品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

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上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn):安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。天津口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書