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水楊酸性胃潰瘍模型:大鼠禁食后水楊酸灌胃。4、結(jié)扎幽門法潰瘍模型:大鼠麻醉后在無菌技術(shù)下結(jié)扎幽門。此模型適合做探索抗?jié)儾∷幬镅芯亢臀笣儼l(fā)病機(jī)制方面的研究。三、動物模型(animalmodelofhypertension)1、腎動脈狹窄性模型:在腎動脈上造成腎動脈狹窄。如果是單側(cè)腎動脈狹窄,則在間隔10~12d后將另一側(cè)腎摘除。手術(shù)幾天后,血壓開始升高,1~3個月后血壓升至高峰,并可長期維持下去。2、腎外包扎性模型:腎外異物包扎,壓迫腎實(shí)質(zhì),造成腎組織缺血,使腎素形成增加,血壓上升。3、應(yīng)激性模型:應(yīng)激性大鼠模型常采用噪聲和足底電擊的復(fù)合刺激,每天2次,每次2h,約20d大鼠可形成很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。鎮(zhèn)江疾病動物模型建模供應(yīng)商
糖尿病動物模型(animalmodelofdiabetesmellitus)1、病毒誘發(fā)法:DBA/2雌性小鼠,皮下接種腦炎、心肌炎病毒M型變異株4~7d后出現(xiàn)明顯的,伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。2、四氧嘧啶法:SD大鼠200g左右,雌雄不限,四氧嘧啶靜脈注射1次,觀察血糖>300mg/dl,持續(xù)2周可以認(rèn)為造模成功。3、鏈脲菌素法:將鏈脲菌素在酸化生理鹽水中溶解成1%溶液,給大鼠靜脈注射。觀察血糖>400mg/dl,持續(xù)3d即可認(rèn)為是造模成功。4、高糖飼喂誘發(fā)法:選用SHR/NLHCP大鼠5周齡,喂飼含54%蔗糖飲食。金山區(qū)疾病動物模型建模價格查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻(xiàn)。
該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。
人乳腺*裸鼠模型:1、實(shí)驗方法:**細(xì)胞移植法、**組織塊移植法。a.**細(xì)胞移植:**細(xì)胞在二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)至足夠數(shù)量。取對數(shù)生長期的**細(xì)胞,用0.25%胰酶消化,用不完全培養(yǎng)液配成濃度不低于1×107個/mL的細(xì)胞懸液,于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細(xì)胞懸液,注意每次注射前需混勻細(xì)胞懸液。b.**組織塊移植:**接種于動物長至1cm時,取新鮮的**組織塊,在不完全培養(yǎng)液中漂洗,切取生長良好、魚肉裝的瘤組織,將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動物接種部位消毒,剪一小口,將小**塊經(jīng)這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊,如切口較大需要縫合切口。實(shí)驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實(shí)驗者的日常管理和實(shí)驗操作。
無論營養(yǎng)學(xué)和環(huán)境衛(wèi)生學(xué)等方面,同一時期內(nèi)很難在人身上取得一定數(shù)量的定性疾病材料。動物模型不僅在群體的數(shù)量上容易得到滿足,而且可以通過投服一定劑量的藥物或移植一定數(shù)量的**等方式,限定可變性,取得條件一致的模型材料。(五)可以簡化實(shí)驗操作和樣品收集動物模型作為人類疾病的“縮影”,便于研究者按實(shí)驗?zāi)康男枰S時采取各種樣品,甚至及時處死動物收集樣本,這在臨床是難以辦到的。實(shí)驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實(shí)驗者的日常管理和實(shí)驗操作。模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用,容易復(fù)制,實(shí)驗中便于操作和采集各種標(biāo)本。徐州疾病動物模型建模購買
小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。鎮(zhèn)江疾病動物模型建模供應(yīng)商
具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點(diǎn):**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。鎮(zhèn)江疾病動物模型建模供應(yīng)商