浦東新區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理

    放血致失血性貧血小鼠模型放血致失血性貧血小鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱：放血致失血性貧血小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：KM小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：約4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：18~22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2014放血致失血性貧血小鼠模型3個(gè)工作日詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法：眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血，，并測(cè)外周血紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）及血紅蛋白含量（Hb）。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢檢測(cè)外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組小鼠放血后24小時(shí)的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降，低于正常值參考值，且與正常對(duì)照組比較具**性差異（P<），表明成功構(gòu)建了失血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷！Ｈ?、交付?biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說明：1、如有特殊要求，請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。臨床上平時(shí)不易見到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來。浦東新區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理

空白組卵巢內(nèi)細(xì)胞形態(tài)完整，可見各級(jí)卵泡生長活躍，并大多數(shù)為原始卵泡，卵泡顆粒層較多，黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細(xì)胞浸潤，各級(jí)卵泡減少，閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見很少次各級(jí)卵泡，及成熟卵泡，大多數(shù)為閉鎖卵泡，卵泡顆粒層變薄，黃體明顯減少。結(jié)論：使用％氯化鈉溶液及10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天，造模效果比較好。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出：本發(fā)明可對(duì)比不同劑量順鉑、不同給藥時(shí)間的卵巢早衰造模方法，從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領(lǐng)域技術(shù)人員提供上述實(shí)施例，以完全公開和描述如何實(shí)施和使用所主張的實(shí)施方案，而不是用于限制本文公開的范圍。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的修飾將在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。鎮(zhèn)江面癱疾病動(dòng)物模型建模小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。

pcrmix：反應(yīng)條件：pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示，從圖3中可以看出，6、8、9號(hào)為pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng)，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴(kuò)增出344bp的產(chǎn)物，而野生型沒有。pcr體系：反應(yīng)條件：(2)f1代小鼠測(cè)序：通過pcr擴(kuò)增后測(cè)序鑒定小鼠基因型，如圖4所示，為6號(hào)pirb基因敲入小鼠測(cè)序峰圖，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測(cè)f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子，切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測(cè)過程如下：步驟a、提取f1代小鼠尾部dna；步驟b、制備探針，通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。

疾病動(dòng)物模型是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。關(guān)于動(dòng)物模型的研究就是有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用科學(xué)，研究各種模型動(dòng)物的生物學(xué)特性和疾病特點(diǎn)，進(jìn)而研究動(dòng)物疾病發(fā)展過程。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立，是用人為的方法，使動(dòng)物在一定的治病因素（物理的、化學(xué)的、生物的）作用下，造成動(dòng)物組織、或全身一定程度損害，出現(xiàn)某些類似動(dòng)物疾病的功能、代謝、形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的變化或各種疾病，通過這種手段來研究動(dòng)物疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律，為研究動(dòng)物疾病的預(yù)防、（包括新藥物試用）提供理論依據(jù)。動(dòng)物疾病模型的另一個(gè)富有成效的用途。

pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特異性組織或細(xì)胞中。其中pirb-cwt小鼠表達(dá)cre，但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表達(dá)cre并分別含有一個(gè)或者兩個(gè)loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對(duì)引物，用pcr來驗(yàn)證：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的樣本不夠純，或者pcr的延伸時(shí)間不夠長，可能擴(kuò)增不出來1180bp的產(chǎn)物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學(xué)院pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列?？梢試?yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。鎮(zhèn)江面癱疾病動(dòng)物模型建模

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動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。（一）避免了在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來的風(fēng)險(xiǎn)臨床上對(duì)外傷、中毒、腫痛病因等研究是有一定困難的，甚至是不可能的，如急性和慢性呼吸系統(tǒng)疾病研究進(jìn)很難重復(fù)環(huán)境污染的作用。輻射對(duì)機(jī)體的損傷也不可能在人身上反復(fù)實(shí)驗(yàn)。而動(dòng)物可以作為人類的替難者，在人為設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)條件下反復(fù)觀察和研究。因此，應(yīng)用動(dòng)物模型，除了能克服在人類研究中經(jīng)常會(huì)遇到的理論和社會(huì)限制外，還容許采用某些不能應(yīng)用于人類的方法學(xué)途徑，甚至為了研究需要可以損傷動(dòng)物組織、或處死動(dòng)物。（二）臨床上平時(shí)不易見到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來臨床上平時(shí)很難收集到放射病、毒氣中毒、烈性傳染病等病人，而實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)研究目的要求隨時(shí)采用實(shí)驗(yàn)性誘發(fā)的方法在動(dòng)物身上復(fù)制出來。浦東新區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理