浦東新區(qū)疾病動物模型建模評價

球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型，實驗動物種屬：新西蘭兔，實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：用球囊拉傷誘導法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉，經(jīng)右股淺動脈，將3.5F球囊擴張導管插至腹主動脈20cm，球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出，反復3次。球囊拉傷手術后，動物喂以高脂飼料，連續(xù)9周，每天給料兩次，自由飲水。實驗結束后取腹主動脈斑塊進行組織病理學檢查。2、檢測標準：腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。浦東新區(qū)疾病動物模型建模評價

    實驗期間每天進行陰道涂片，觀測動情周期變化。進一步地，檢測***水平是指：檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地，檢測對比卵巢重量是指：比較各組大鼠雙側卵巢臟器系數(shù)。進一步地，陰道涂片是指：采用陰道脫落細胞涂片法，使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，為基礎研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎。本發(fā)明使用的各種術語和短語具有本領域技術人員公知的一般含義。提及的術語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準。附圖說明圖1：e2水平檢測結果示意圖。圖2：fsh水平檢測結果示意圖。圖3：lh水平檢測結果示意圖。圖4：大鼠體重檢測結果示意圖。圖5：大鼠卵巢重量統(tǒng)計示意圖。圖6：動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：動情前期，動情期，動情后期，動情間期。圖7：he染色觀察不同方法造模對卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：空白組，2mg組，4mg組，6mg組。具體實施方式下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本領域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。鹽城成瘤疾病動物模型建模大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。

    pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特異性組織或細胞中。其中pirb-cwt小鼠表達cre，但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表達cre并分別含有一個或者兩個loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對引物，用pcr來驗證：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的樣本不夠純，或者pcr的延伸時間不夠長，可能擴增不出來1180bp的產物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學院pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。

    pcrmix：反應條件：pcr擴增產物的電泳鑒定結果如圖3所示，從圖3中可以看出，6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr產物沒有這兩個擴增產物。(c)短鏈pcr反應，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產物，而野生型沒有。pcr體系：反應條件：(2)f1代小鼠測序：通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型，如圖4所示，為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸內切酶切割dna分子，切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下：步驟a、提取f1代小鼠尾部dna；步驟b、制備探針，通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。早期階段科學假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構建及其實驗室研究。

1、動物模型名稱：酒精誘導的肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：5周5、實驗動物體重：150g-160g6、實驗動物環(huán)境：SPF級。1、實驗方法：用酒精誘導法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物（酒精：吡唑：玉米油＝10mL：25mg：2mL）造模，每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油＝1：3，連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準：肝組織可見肝硬化病理改變（S1級~S4級）。小鼠是人類疾病理想的動物模型不僅因為小鼠在生理上與人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。江蘇正規(guī)疾病動物模型建模

如何定義好的小鼠疾病模型？浦東新區(qū)疾病動物模型建模評價

1、動物模型名稱：淚腺摘除聯(lián)合新潔爾滅致干眼兔模型2、實驗動物種屬：新西蘭兔3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：2~3月齡5、實驗動物體重：1.8~2.5kg6、實驗動物環(huán)境：SPF級，1、實驗方法：摘除淚腺聯(lián)合新潔爾滅誘導。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射進速眠新Ⅱ進行麻醉。麻醉后，進行淚腺摘除手術，眼瞼局部以75％酒精消毒，鋪洞巾，于眼下眶周部做一切口，小心分離皮膚、肌肉、筋膜，尋找到淚腺后完整摘除之，然后縫合創(chuàng)口。術畢，滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環(huán)素可的松眼藥膏，共7d。術后兔創(chuàng)口愈合后進行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液，2次/天，2滴/次，連續(xù)用藥14d。2、檢測標準：SchirmerI試驗淚液分泌減少，1%虎紅角膜染色試驗虎紅著色評分值高，角膜出現(xiàn)病理改變。浦東新區(qū)疾病動物模型建模評價

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