天津正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-01-21

與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過(guò)夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過(guò)基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)如今市場(chǎng)的影響。天津正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè):EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。福建咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒dU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒找哪家比較安心?上海東寰不錯(cuò)。

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EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡(jiǎn)單易行。”細(xì)胞增殖檢測(cè)方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測(cè)新合成的DNA,簡(jiǎn)單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測(cè)方法非常快速,且只需簡(jiǎn)單的幾個(gè)步驟,因此也適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞的活力

EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些?

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CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過(guò)程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的重要組成部分。江蘇正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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細(xì)胞增殖的能力是評(píng)價(jià)細(xì)胞、代謝、生理、病理狀況、細(xì)胞活性、基因毒性等的重要指標(biāo)之一,細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān),比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等,但是檢測(cè)細(xì)胞增殖現(xiàn)象的*直接*準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測(cè)遺傳物質(zhì)DNA的合成,這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號(hào)通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。目前,基于DNA的合成原理,人們*初開(kāi)發(fā)了工具是BrdU染色法,但是這種方法操作耗時(shí)長(zhǎng),往往需要過(guò)夜處理細(xì)胞,操作繁雜,比如需要DNA變性、抗原修復(fù)以及抗原抗體反應(yīng)等操作,后來(lái)在BrdU的基礎(chǔ)上,人們開(kāi)發(fā)出了**性的探針--EdU,這種方法不需要繁雜的操作,節(jié)約時(shí)間,且反應(yīng)更靈敏和準(zhǔn)確。天津正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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