采用酶法提取膠原蛋白時,必須嚴格控制提取條件:首先,酶作用時間必須適當。如果時間過短,膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中,影響提取率;如果酶作用時間過長,膠原蛋白會水解過度,產(chǎn)生過多的苦味小分子低聚肽,不僅會增加分離純化的難度,也會影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。其次,酶解溫度要適宜。溫度過低,酶的作用效果不明顯;溫度過高會引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報道,當介質(zhì)pH略低于中性時,膠原蛋白的變性溫度為40~41℃,當介質(zhì)pH為酸性時,膠原蛋白的變性溫度為38~39℃,而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7~12℃。所以,如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性,在提取過程中應使提取溫度低于變性溫度。第三,需選用適當?shù)拿浮R话銖年懮溉閯游锝M織中提取膠原蛋白時,采用胃蛋白酶在其較適作用溫度下進行提取是合理的,但對于魚類等水生動物,由于其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動物低,因此許多蛋白酶便不適用,如果在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動物皮及其加工副產(chǎn)物中。 這些食物中的膠原蛋白分子量非常大,極不容易被人體吸收。湖北小分子膠原蛋白固體飲料
膠原蛋白中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量較高,特別是甘氨酸,約占總氨基酸的27%,也有報道說占1/3,即每隔兩個其它氨基酸殘基(X,Y)即有一個甘氨酸,故其肽鏈可用(Gly-X-Y)n來表示。每個原膠原分子由三條α-肽鏈組成,α-肽鏈自身為α螺旋結(jié)構(gòu),肽鏈中每三個氨基酸殘基中就有一個要經(jīng)過此三股螺旋中間區(qū),而此處空間十分狹窄,只有甘氨酸適合于此位置,由此可解釋其氨基酸組成中每隔兩個氨基酸殘基出現(xiàn)一個甘氨酸的特點。特別注意,X、Y均表示任意的氨基酸,只不過X通常是脯氨酸,Y通常指羥脯氨酸。同時還含有少量3-羥脯氨酸(3-hydroxyproline)和5-羥賴氨酸(5-hydroxylysine,Hyl)。羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。三條α-肽鏈借范德化力、氫鍵及共價交聯(lián)則以平行、右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),使膠原具有很高的拉伸強度。 北京膠原蛋白哪個牌子好膠原蛋白已廣泛應用于各種化學試劑交聯(lián)膠原。
愛美的人士都知道,豬蹄、鳳爪等這樣的食物中含有豐富的膠原蛋白,多吃可以美容養(yǎng)顏,而事實并非如此。實踐證明,豬蹄、鳳爪等等這些食物中的膠原蛋白分子量非常大,極不容易被人體吸收。皮膚真正需要的膠原蛋白,其實是一種由3個氨基酸分子組成的膠原蛋白即“膠原三肽”。在我們?nèi)粘I钪校覀儠^察到下面的現(xiàn)象,它們很好的解釋了膠原蛋白、多肽、氨基酸之間的關系。膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會兒的奶白色雞湯,待一段時間后,又變?yōu)榍鍦?,現(xiàn)在煮成一鍋高湯,就如膠原蛋白被不斷分解后,現(xiàn)在分解成為較小的氨基酸,氨基酸分子進入人體后,合成膠原蛋白,較終被人體吸收。
由于膠原蛋白廣布于人體各組織中,系各組織中的重要成分并構(gòu)成組織細胞外基質(zhì)(Extracelluarmatrix,ECM),其性質(zhì)是一種天然的組織支架材料。從臨床應用的角度,人們用膠原蛋白制成各種各樣的組織工程支架,如皮膚、骨組織、氣管和血管支架等。然而以膠原本身而言就有兩大類,即純膠原制備的支架和與其它成分復合而成的復合物支架。純膠原蛋白組織工程支架具有生物相容性好、易加工、可塑性并能促進細胞黏附、增殖等優(yōu)點,但也有膠原蛋白的力學性能差,在含水時難以塑形,無法支撐組織重建等不足。其次在修復處的新生組織會產(chǎn)生各種各樣的酶,將膠原蛋白水解,導致支架崩解,而采用交聯(lián)或復合的方式能改善與提高。現(xiàn)已成功地將膠原蛋白基生物材料用于人工皮膚、人工骨、軟骨移植和神經(jīng)導管等組織工程產(chǎn)品。有人用嵌入軟骨細胞的膠原蛋白凝膠來修復軟骨缺陷并嘗試用上皮、內(nèi)皮和角膜細胞附在膠原蛋白海綿以適應角膜組織。還有人混合自體同源的間葉細胞中的莖狀細胞和膠原蛋白凝膠制作肌腱用于腱后修復。 膠原三肽更能有效的服務于人類的健康與美麗。
可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法,其中鹽析法、離心法和電泳法較為常用。由于單一方法難以完全分離純化膠原蛋白,實際操作都是通過復合法來達到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl;離心法常選用制備型低溫超速離心機;電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),該法既可用于膠原蛋白的分離純化,還可用來測定膠原蛋白分子的相對分子質(zhì)量。像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì),然后往沉淀中10%的胃蛋白酶,在4℃的條件下消化24h,以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL,使它終濃度達到,靜止過夜,再離心,現(xiàn)在的沉淀就是I型膠原蛋白。 膠原蛋白能保持較好的組織穩(wěn)定性和機械抗張強度、免疫原性測試為陰性,符合臨床應用。云南口服膠原蛋白原料廠家
只有攝入足夠的可與鈣結(jié)合的膠原蛋白,才能使鈣在體內(nèi)被較快消化吸收。湖北小分子膠原蛋白固體飲料
相對于較大分子膠原蛋白而言,膠原三肽更能有效的服務于人類的健康與美麗。膠原三肽主要具有以下功能:修復:膠原三肽能直接滲入肌膚底層,且與周圍組織的親和性好,可協(xié)助細胞制造成膠原蛋白,促使皮膚細胞正常成長。營養(yǎng):膠原三肽對皮膚的滲透性強,可透過角質(zhì)層與皮膚上皮細胞結(jié)合,參與和改善皮膚細胞的代謝,使皮膚中的膠原蛋白活性加強。它能保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,改善皮膚細胞生存環(huán)境和促進皮膚組織的新陳代謝,增強血液循環(huán),達到滋潤皮膚的目的。豐。xiong:膠原三肽中獨有的羥脯氨酸具有收緊結(jié)締組織的作用,能使松弛的組織緊實、承托起下垂的乳房,使乳房挺拔、豐滿、富有彈性。湖北小分子膠原蛋白固體飲料
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