由于氨基酸組成和交聯(lián)度等方面的差異,使得水產(chǎn)動(dòng)物尤其是其加工廢棄物——皮、骨、鱗中所含有的豐富的膠原蛋白具有很多牲畜膠原蛋白所沒有的優(yōu)點(diǎn),另外來(lái)源于海洋動(dòng)物的膠原蛋白在一些方面明顯優(yōu)于陸生動(dòng)物的膠原蛋白,比如具有低抗原性、低過敏性等特性。因此水產(chǎn)膠原蛋白可能逐步替代陸生動(dòng)物膠原蛋白。膠原蛋白種類較多,常見類型為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅴ型和Ⅺ型。膠原蛋白因具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性,因此在食品、醫(yī)藥、組織工程、化妝品等領(lǐng)域獲得比較廣的應(yīng)用。相對(duì)于較大分子膠原蛋白而言,膠原三肽更能有效的服務(wù)于人類的健康與美麗。河南海參膠原蛋白肽原液
將膠原蛋白和聚乙烯吡咯烷酮溶在檸檬酸緩沖液里制得膠原蛋白-PVP聚合物(C-PVP),用于受傷骨骼的加固不僅效果好,安全性也高,即使長(zhǎng)周期的連續(xù)用藥,不管是實(shí)驗(yàn)還是臨床試驗(yàn)都不表現(xiàn)出淋巴腫大、DNA損傷,不會(huì)引起肝和腎的代謝紊亂,也不誘發(fā)人體產(chǎn)生抗C-PVP的抗體。有人研究了膳食銅缺乏與老鼠心臟膠原蛋白含量之間的關(guān)系。通過SDS-PAGE分析,再用考馬斯亮藍(lán)染色,結(jié)果表明檢測(cè)改變了的膠原蛋白的額外代謝特征可預(yù)測(cè)銅缺乏;由于肝臟纖維化可減少蛋白質(zhì)含量,因此還可通過測(cè)定肝臟中膠原蛋白的含量來(lái)預(yù)測(cè)肝臟纖維化。Anoectochilusformosanus的水提取物(AFE)則可降低CCl4誘發(fā)的肝臟纖維化,降低肝臟膠原蛋白的含量。膠原蛋白還是鞏膜的主要成分,對(duì)眼睛的作用也非常重要,如果鞏膜中膠原蛋白的合成減少而降解增加就會(huì)導(dǎo)致近視。 廣東牡蠣膠原蛋白在這些酶的較適作用溫度下提取可能會(huì)破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。
膠原的相對(duì)分子質(zhì)量大,電泳圖有3條泳帶,在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈,在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對(duì)分子質(zhì)量可達(dá)100kD,1個(gè)膠原分子相對(duì)分子質(zhì)量為300kD。多肽分子量的測(cè)定方法常用SDS-PAGE,凝膠色譜法以及質(zhì)譜法。有人采用凝膠過濾色譜法測(cè)定脫鉻革屑中膠原水解產(chǎn)物分子量分布在。飛行時(shí)間質(zhì)譜法測(cè)定比目魚皮膠原寡肽分子量的分布主要集中在~。動(dòng)物蛋白酶水解后的膠原多肽的分子量在2~7kD,比植物蛋白酶水解的膠原多肽分子量范圍更廣。膠原的熱穩(wěn)定性是指測(cè)定其在水系中纖維的熱收縮溫度(Ts),或溶液中分子的熱變性溫度(Td)。Ts和Td之差一般在20~25℃,而Ts值較Td值容易測(cè)定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度,另外還與其亞氨基酸(脯氨酸和羥脯氨酸)的含量有關(guān),尤其是羥脯氨酸含量,它們之間存在正相關(guān),冷水性魚類的羥脯氨酸含量比較低,所以冷水性魚類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚類,而又都低于陸生動(dòng)物。但魚皮膠原蛋白與魚肉膠原蛋白相比,其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右,這與肌肉膠原中脯氨酸的羥基化率較真皮膠原高有關(guān)。有人測(cè)定了多種魚皮可溶性膠原蛋白的氨基酸組成。
預(yù)處理除膠原蛋白外,動(dòng)物骨中還含有油脂、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動(dòng)物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油?,F(xiàn)在除去骨中無(wú)機(jī)物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質(zhì)量的,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值,37℃條件下處理120min,然后在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達(dá)18%;還有人用EDTA溶液()浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。[87-89]膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來(lái)說(shuō),高壓輔助和熱水抽提針對(duì)明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對(duì)膠原的提取,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。 膠原蛋白是人體骨骼,尤其是軟骨組織中的重要組成成分。
膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會(huì)兒的奶白色雞湯,待一段時(shí)間后,又變?yōu)榍鍦F(xiàn)在煮成一鍋高湯,就如膠原蛋白被不斷分解后,現(xiàn)在分解成為較小的氨基酸,氨基酸分子進(jìn)入人體后,合成膠原蛋白,較終被人體吸收。膠原三肽的分子量極小,目前全球較小的CTP膠原三肽,CTP膠原三肽的分子量只280道爾頓,是目前全球分子量較小的,與皮膚膠原蛋白相同的基本結(jié)構(gòu),無(wú)需分解,能夠被皮膚直接吸收,吸收率高達(dá)99%,是普通膠原蛋白的36倍。在我們?nèi)粘I钪校覀儠?huì)觀察到下面的現(xiàn)象,它們很好的解釋了膠原蛋白、多肽、氨基酸之間的關(guān)系。膠原三肽的用途化妝品中的作用保濕、滋養(yǎng)、亮膚、緊膚、防皺、修復(fù)。天津骨膠原蛋白哪個(gè)牌子好
采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。河南海參膠原蛋白肽原液
酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動(dòng)物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對(duì)酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應(yīng)用較多。將膠原進(jìn)行限制性降解,即將末端肽切割下來(lái),由于膠原肽鏈間的共價(jià)鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機(jī)酸而被提取出來(lái)。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率;而且還不會(huì)破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時(shí)間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實(shí)際操作中,大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機(jī)酸多為乙酸。 河南海參膠原蛋白肽原液
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