河南熒光染料藍色

來源: 發(fā)布時間:2024-05-15

一:染色液制備1、配制儲液:儲液用無水DMSO或無水EtOH配制,濃度1~5mM。注:未使用的儲液建議分裝后儲存在-20℃,避免反復凍融。2、工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲液,配制濃度為1~5μM的工作液。注:工作液**終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始比較好濃度的摸索。二:懸浮細胞染色1、加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同??梢?0min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標記效果。3、孵育結(jié)束,1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。4、重復步驟3兩次以上。南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列)。河南熒光染料藍色

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過標記——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團大于10mol。雖然過標記的蛋白也可以使用,但可能會引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性,這些都會造成非特異性結(jié)合。過標記還會引起熒光淬滅。可以增加蛋白或減少反應(yīng)時間。3.未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物,但仍可能會有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中,會使標記計算的值偏高??捎梅蛛x柱再次分離或透析去除。4.蛋白或蛋白偶聯(lián)物無法洗脫——不要再加緩沖液,只需再次離心一次或幾次。脂質(zhì)熒光染料DAPI羅丹明123一種可對活細胞線粒體染色的細胞染色試劑。

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熒光染料在細胞實驗中具有廣泛的應(yīng)用1、細胞膜標記:可以使用熒光染料標記細胞膜,以觀察和研究細胞膜的動態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標記:用熒光染料標記染色體或DNA,可以觀察和分析DNA復制、轉(zhuǎn)錄、修復等過程3、蛋白質(zhì)標記:通過熒光染料標記蛋白質(zhì),可以研究蛋白質(zhì)的相互作用、定位和運動等特性。4、細胞器標記:使用特定波長的熒光染料可以標記和可視化細胞中的線粒體、溶酶體等細胞器。5、神經(jīng)科學應(yīng)用:熒光染料在神經(jīng)科學中也有廣泛應(yīng)用,如標記神經(jīng)元和突觸,觀察神經(jīng)信號的傳遞等。6、基因表達分析:通過熒光染料標記基因表達產(chǎn)物,可以定量分析基因的表達水平和細胞中的分布情況。

常用抗體標記熒光染料的特性及其應(yīng)用

1、FITC:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長525nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強度易受PH值影響,PH值降低時其熒光強度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長519nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)質(zhì)優(yōu)價廉,歡迎咨詢。3、Cy3:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長570nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL2通道檢測:3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術(shù),熒光強度低于PE。 花青類熒光染料屬于共振染料,其特征在于具有離域電荷的氮原子(兩個氮原子)之間的聚甲炔染料。

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熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復合熒光染料使用。其中復合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復合染料在受體分子的激發(fā)波長被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長發(fā)射一個光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個光譜范圍。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。貴州高分子熒光染料

Super Flour 系列在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。河南熒光染料藍色

使用螢火蟲熒光素酶(Fluc)作為報告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像(BLI)是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號強度相對于 D-熒光素注射后的時間進行繪制,以生成時間-強度曲線。除了峰值信號外,還確定注射 D-熒光素后固定時間點(5、10、15 和 20 分鐘)的信號作為峰值信號的替代。給定時間-強度曲線中的信號針對曲線中的峰值信號進行歸一化,以表示 D-熒光素注射后時間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素(腹膜內(nèi)或靜脈注射)儲備液:對于 20 g 小鼠,標準 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素(鉀鹽或鈉鹽)并溶解在 dPBS(不含鈣或鎂)中,**終濃度為 15 mg/mL。通過吸取 5-10 mL 無菌水來預濕 0.22 μm 過濾器。河南熒光染料藍色

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