異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術(shù)中。在495/517nm處,該染料會產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應基團與不同抗體結(jié)合,該基團可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質(zhì)量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料,且其被當成AlexaFluor?488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-...
熒光染料的作用過程吸收激發(fā)光:當熒光染料暴露在特定波長的激發(fā)光下時,染料分子中的電子吸收光子的能量,從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。這個過程非常迅速,通常在飛秒到皮秒的時間尺度內(nèi)完成25。激發(fā)態(tài)的電子弛豫:處于激發(fā)態(tài)的電子不穩(wěn)定,會通過各種方式釋放能量,回到基態(tài)。這個過程包括內(nèi)部轉(zhuǎn)換和振動弛豫等。內(nèi)部轉(zhuǎn)換是指激發(fā)態(tài)的電子通過無輻射躍遷的方式回到能量較低的激發(fā)態(tài),而振動弛豫則是指激發(fā)態(tài)的電子通過與周圍分子的碰撞等方式,將多余的能量轉(zhuǎn)化為分子的振動能,從而使電子處于激發(fā)態(tài)的比較低振動能級35。發(fā)射熒光:當激發(fā)態(tài)的電子回到基態(tài)時,會發(fā)射出熒光。熒光的波長通常比激發(fā)光的波長更長,這是因為在發(fā)射熒光的過程中,電子釋...
選擇熒光染料時要考慮那些因素:激發(fā)波長處的消光系數(shù)應盡可能高:消光系數(shù)是衡量可以吸收多少光子的量度。量子產(chǎn)率應該盡可能高:這是吸收光子與發(fā)射光子的比率。消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的乘積就是亮度。熒光染料應該是光穩(wěn)定的:遺憾的是,比較不同公司染料的光穩(wěn)定性的研究并不多。光致變色行為:對于STORM實驗,您需要一個閃爍的熒光團。但是,對于分子跟蹤實驗,您***不想要閃爍的熒光團?;?死細胞滲透性。您想要的反應側(cè)基(例如HaloTag、抗體等)。當您使用多個熒光探針時,尤其是當您量化共定位時,請謹慎處理其他顏色通道中的滲色。單獨測試所有熒光探針以評估滲透。小動物成像熒光染料能夠選擇性地與目標細胞或組織結(jié)合。...
除了以上應用,吲哚菁綠還可以用于生物識別和藥物輸送。在生物識別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合,從而實現(xiàn)對這些分子的檢測和定量分析。這項技術(shù)在生物醫(yī)學研究和臨床診斷中有著廣泛的應用前景。此外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分,將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中,通過近紅外光***釋放藥物,實現(xiàn)靶向***。吲哚菁綠作為一種多功能的熒光染料,在醫(yī)學和生物領域具有廣泛的應用前景。其綠色溶解度的優(yōu)良性能,使其能夠在水溶液中快速溶解,為其在醫(yī)學影像學、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面的應用奠定了基礎。隨著科學技術(shù)的不斷進步,相信吲哚菁綠在未來將發(fā)揮更大的潛力,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻。吲哚菁綠作...
結(jié)構(gòu)修飾以適應不同條件增強對特定生物標志物的敏感性:Lysophosphatidicacids(LPA)是幾種生理過程的關(guān)鍵生物標志物。為了更好地檢測LPA,合成了帶有結(jié)構(gòu)適應性的苯乙烯基吡啶鎓染料,通過詳細研究結(jié)構(gòu)對聚集誘導熒光猝滅程度的影響,使其在水性介質(zhì)中對LPA具有增強的親和力。光譜研究結(jié)合時間分辨熒光測定揭示了激基締合物形成對熒光探針的熒光猝滅機制的貢獻。DFT計算支持了結(jié)構(gòu)對檢測靈敏度影響的實驗觀察22。改變供、吸電子基團:二胺基二苯甲酸酯(DAT)具有雙重推拉電子結(jié)構(gòu)、分子內(nèi)氫鍵,使其具有優(yōu)異的熒光特性。通過改變DAT的供、吸電子基團可以改變單苯環(huán)熒光染料的熒光發(fā)光行為。例如,在...
生物醫(yī)學領域在細胞熒光成像中,近紅外氧雜蒽熒光染料可用于細胞熒光染色成像,如熒光染料NXD-3具有良好的細胞線粒體靶向熒光標記效果5。通過特定的熒光染料可以對細胞內(nèi)的特定結(jié)構(gòu)進行標記,有助于研究人員觀察細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能。高分辨率熔解分析(HRM)中,不同的DNA結(jié)合熒光染料可用于PCR擴增和熔解曲線分析等。例如,SYTO16和SYTO13在多數(shù)檢測中性能與商業(yè)HRM染料相當,適用于實時PCR和HRM應用1418。二、化學領域為考察小分子配基與不同核酸結(jié)構(gòu)的結(jié)合機理,發(fā)展新的核酸探針分子,合成了一種新型一次甲基不對稱菁染料(MTP)。MTP可作為熒光探針分子用于區(qū)別不同結(jié)構(gòu)的核酸分子,其與平...
Cy5:激發(fā)波長633/635nm,比較大發(fā)射波長670nm。1)其標記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL4通道檢測;3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術(shù),熒光強度低于APC。5)與單核和粒細胞非特異性結(jié)合多,易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。 5、PE:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長575nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL2通道檢測;3)其熒光泯滅性強,不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù),但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。 6、PE-TR:激發(fā)波長48...
熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復合熒光染料使用。其中復合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復合染料在受體分子的激發(fā)波長被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長發(fā)射一個光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開發(fā)的用于科研和臨床應用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個光譜范圍。D-熒光素(D-Lucif...
為什么要使用熒光染料?雖然不同的染色技術(shù)(即考馬斯染色、銀染色、熒光染色)可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì),但使用熒光染料具有其獨特的優(yōu)勢。他們提供:高靈敏度:對于大多數(shù)分析物,熒光測量的靈敏度比吸光度測量高1000倍,即使在使用小樣本時也可以令人滿意地達到ppt(萬億分之一)的檢測限。寬線性動態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾:由于吸收光的材料數(shù)量眾多,分光光度測量通常會遇到干擾問題。在進行熒光測量時不會遇到這個問題,因為只有少數(shù)材料具有熒光能力。高通量:熒光測量具有簡單而強大的協(xié)議,并且可以自動化用于高通量應用。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5...
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標記效率低——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應降低了標記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會影響標記效率。3)標記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應混合物的...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 D...
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料,具有廣泛的應用,作為抗體和其他探針標記,用熒光顯微鏡,流式細胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實驗。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性,是流式細胞儀和免疫熒光中生物檢測**常用的熒光標記之一。**常用的熒光素包括用于標記蛋白質(zhì)(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于標記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物,以及一系列具有針對細胞標記...
小動物***成像技術(shù)(invivoimagingtechnology)是利用高靈敏度的光學檢測儀器直接檢測動物***體內(nèi)的細胞活動和基因行為研究的一類技術(shù),是近年來發(fā)展**快的生命科學研究方法,是**直接觀察細胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù),已廣泛應用于生命科學研究的各個領域[1]。***動物體內(nèi)光學成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是利用熒光素酶報告基因在***內(nèi)表達產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學反映產(chǎn)生熒光。而熒光發(fā)光成像技術(shù)是將熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標記的小分子物質(zhì)如基因、細胞也可是小分子藥物、抗體、納米材料等導入到***體內(nèi),通過小動物***成像系統(tǒng)的激發(fā)光源激發(fā)...
第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化學公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺,具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢,因此后者不常使用。與DAPI相似,此類染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值,在無結(jié)合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細胞滲透作用,因此可用于固定細胞和活細胞。與DAPI不同是,Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無法透過細胞膜。在細胞培養(yǎng)中,因為該染色劑無法進入完好的細胞內(nèi),所以常常被用來區(qū)分活細胞和死細胞。碘化丙啶也是一種結(jié)合劑,但...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時,Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標記核酸...
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...
一、體外生物發(fā)光試驗熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配置)1、用無菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動至熒光素完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsalt溶解于預熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基圖像分析前,向細胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析-注射器濾膜過濾除菌,0.2μm注:成像前在37℃下對細胞進行短時間孵育可增強信號。南京星葉生物熒光染料標記蛋白。...
過標記——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團大于10mol。雖然過標記的蛋白也可以使用,但可能會引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性,這些都會造成非特異性結(jié)合。過標記還會引起熒光淬滅??梢栽黾拥鞍谆驕p少反應時間。3.未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物,但仍可能會有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中,會使標記計算的值偏高??捎梅蛛x柱再次分離或透析去除。4.蛋白或蛋白偶聯(lián)物無法洗脫——不要再加緩沖液,只需再次離心一次或幾次。Super Flour 系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。內(nèi)蒙古南...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光??捎糜跓晒馑孛干锇l(fā)光成像和細胞高通量篩選應用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應原理:首先,在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應,接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測定細胞活力以及細菌計數(shù)。它還用于報告基因檢測??膳c小動物***成像系統(tǒng)配套使用,用于標記LUC基因后的體內(nèi)***熒光檢測。D-熒光素游離酸(D-Luciferin,f...
細胞培養(yǎng)后,需要對其生長情況、形態(tài)甚至生物學性狀進行觀察。由于細胞小而復雜,若不借助適當?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細胞的技術(shù),從光學顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細胞化學法到免疫化學法。細胞染色是研究細胞生物學特征的一種常用手段,然而,對于細胞實驗新手來說,想要獲得一張漂亮的細胞染色圖并不容易。染色試劑不會選、細胞染色不均勻、染色時切片脫落等都是很常見的問題。 細胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料(見表2),它們是一族親脂性的熒光染料,用于細胞的形態(tài)學和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進入細胞膜后,會在整個...
熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其廣泛應用于熒光免疫,熒光探針,細胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復染劑,可作為背景對照,標記細胞核使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。熒光標記的單克隆抗體技術(shù)為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFl...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時,Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標記核酸...
三、流式細胞儀分析1、取對數(shù)生長期的細胞,接種到孔板,過夜培養(yǎng)。2、如果要進行藥物刺激,在細胞中加入感興趣的藥物進行干預,繼續(xù)培養(yǎng)一定時間后,收集細胞,PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細胞,37℃避光孵育15min或更長時間?!咀⒁狻浚河捎诩毎N類和實驗體系不同,Rhodamine123工作液濃度和孵育時間可以根據(jù)預實驗或參考文獻自行調(diào)整。4、用流式細胞儀檢測。 四、實驗案例1、取對數(shù)生長期A549細胞接于六孔板(1*106+2mlDMEM培養(yǎng)基),37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-24h待其貼壁,以便后續(xù)實驗操作.2、棄掉培養(yǎng)液,PBS洗滌兩次.3、用培養(yǎng)基(無血清)稀...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光??捎糜跓晒馑孛干锇l(fā)光成像和細胞高通量篩選應用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應原理:首先,在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應,接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測定細胞活力以及細菌計數(shù)。它還用于報告基因檢測。可與小動物***成像系統(tǒng)配套使用,用于標記LUC基因后的體內(nèi)***熒光檢測。D-熒光素游離酸(D-Luciferin,f...
管可用于實驗室的熒光團數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標記生物相關(guān)分子的小型有機天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點:這些高熒光合成納米晶體由半導體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應用和該領域的顯著進步,已經(jīng)針對特定應用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來,大量復雜的熒光技術(shù)(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應基團這有...
花青類熒光染料屬于共振染料,其特征在于具有離域電荷的氮原子(兩個氮原子)之間的聚甲炔染料。由于與生物分子的低非特異性結(jié)合以及明亮的熒光,花青類熒光染料已成為一些當下流行的用于標記核酸的熒光染料?;ㄇ囝惾玖戏譃閮纱箢悾悍腔腔ㄇ囝惾玖?該組中的一些染料包括cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7和cy7.5。在大多數(shù)情況下,這些染料的特點是水溶性低,但胺的鹽酸鹽和酰肼除外。它們首先溶解在有機溶劑(共溶劑)中,然后在生物分子標記期間添加到含有生物分子的溶液中。而“Cy”**花青,***個數(shù)字**存在于亞油啉基團之間的碳原子數(shù)。另一方面,添加0.5后綴以表示苯并稠合花青。這些熒光染料通常用于有...
注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定比較高信號檢測時間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復凍融。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩(wěn)定性和保存時間更長。 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實驗。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請穿實驗...
CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標記,對于蛋白抗體的標記,可以通過簡單的混合反應來完成結(jié)合,下面我們介紹了蛋白抗體標記的標記方法,具有一定的參考意義。一、比較好蛋白制備1)為獲得標記效果,請制備蛋白(抗體)濃度為2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值為8.5±0.5。如果pH值低于8.0,應使用1M3)如果蛋白濃度低于2mg/mL,標記效率會**降低。為獲得比較好標記效率,建議**終蛋白濃度范圍為2-10mg/mL。4)蛋白必...
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸,納米粒子通常用于不同類型的細胞和組織的熒光成像。當今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點、貴金屬納米顆粒、聚合物點、量子點和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中,與其他分子熒光團和探針相比,納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢,使其成為理想的選擇。除了提高亮度外,納米粒子是惰性的并且往往分布均勻,這有助于在成像過程中獲得更好的結(jié)果。此外,與各種分子熒光團相比,納米顆粒和納米材料沒有細胞毒性,并且不受非特異性結(jié)合問題的影響。由于這些特性,大多數(shù)熒光納米顆粒(染色納米顆粒)可以內(nèi)化到細胞/組織中,并容易靶向給定部位。D-熒光素是熒光素酶 (L...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時,Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標記核酸...