羅丹明123一種可對活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,此熒光染料被應(yīng)用于檢測細(xì)胞內(nèi)的ATP。羅丹明123的比較大激發(fā)波長為507nm,比較大發(fā)射波長為525nm。在熒光顯微鏡下觀察,呈現(xiàn)黃綠色熒光。 一:工作液配制用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)液直接稀釋儲存液到需要的工作液濃度(1~20μM),充分混勻。具體的工作液濃度使用者要根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行調(diào)整?!咀⒁狻浚簩τ诩?xì)胞實(shí)驗(yàn),要控制好總體稀釋倍數(shù),DMSO在...
羰花青染料***用作Di來標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們在脂質(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們在室溫下是油狀物,在水中發(fā)出微弱熒光,但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時,它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞,這些染料就會在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散,導(dǎo)致...
三:貼壁細(xì)胞染色1、將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。2、從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,但要使表面保持濕潤。3、在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。4、37℃孵育細(xì)胞2~20min,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時間不同??梢?0min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。5、吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞,孵育5~10min,然后吸干培養(yǎng)基。但要使表面保持濕潤。四:結(jié)果檢測樣品可在培養(yǎng)基中進(jìn)行檢測,可通過熒光顯微鏡成像或流式細(xì)胞儀分析。小動物成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù)可以在小動物體內(nèi)實(shí)時觀察和研究細(xì)胞、...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL,詳細(xì)計算過程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3...
熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。其中復(fù)合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復(fù)合染料在受體分子的激發(fā)波長被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長發(fā)射一個光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個光譜范圍。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可...
小動物***成像技術(shù)(invivoimagingtechnology)是利用高靈敏度的光學(xué)檢測儀器直接檢測動物***體內(nèi)的細(xì)胞活動和基因行為研究的一類技術(shù),是近年來發(fā)展**快的生命科學(xué)研究方法,是**直接觀察細(xì)胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域[1]。***動物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是利用熒光素酶報告基因在***內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。而熒光發(fā)光成像技術(shù)是將熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標(biāo)記的小分子物質(zhì)如基因、細(xì)胞也可是小分子藥物、抗體、納米材料等導(dǎo)入到***體內(nèi),通過小動物***成像系統(tǒng)的激發(fā)光源激發(fā)...
藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復(fù)合物,屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到,它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學(xué)中,熒光團(tuán)可以與蛋白質(zhì)結(jié)合,例如用于抗原檢測的抗體等,因?yàn)樗軌虬l(fā)出明亮的熒光。由于熒光團(tuán)往往會很快發(fā)生光漂白,因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細(xì)胞術(shù)?!鶆e藻藍(lán)蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣,別藻藍(lán)蛋白也屬于藻膽蛋白家族,是從紅藻中分離出來的。在594和633nm的激光線激發(fā)下,熒光團(tuán)的比較大吸光度在650nm處,而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比,熒光團(tuán)的靈敏度已顯示高5至10倍,并具有許多其他有益特性,包括大斯托克斯位移、高水溶性、長波長...
常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用 1、FITC:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長525nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強(qiáng)度易受PH值影響,PH值降低時其熒光強(qiáng)度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長519nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測;3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司Su...
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸,納米粒子通常用于不同類型的細(xì)胞和組織的熒光成像。當(dāng)今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點(diǎn)、貴金屬納米顆粒、聚合物點(diǎn)、量子點(diǎn)和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中,與其他分子熒光團(tuán)和探針相比,納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢,使其成為理想的選擇。除了提高亮度外,納米粒子是惰性的并且往往分布均勻,這有助于在成像過程中獲得更好的結(jié)果。此外,與各種分子熒光團(tuán)相比,納米顆粒和納米材料沒有細(xì)胞毒性,并且不受非特異性結(jié)合問題的影響。由于這些特性,大多數(shù)熒光納米顆粒(染色納米顆粒)可以內(nèi)化到細(xì)胞/組織中,并容易靶向給定部位。Super Flour 系...
羅丹明屬于呫噸族。與市場上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們在聚合物納米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個氮處具有兩個烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細(xì)胞膜研究外,我們經(jīng)常也會對一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等,而對于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細(xì)胞核染色,可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細(xì)胞骨架的染色神器,羅丹明標(biāo)記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細(xì)胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRIT...
CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料,其*大發(fā)射波長為670nm,其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀,檢測通道一般是FL4通道。除流式細(xì)胞術(shù)外,Cy5同樣適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)。需注意的是,Cy5與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的非特異性結(jié)合多,實(shí)驗(yàn)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽性。Cy5.5含有一個游離胺基,可與多種官能團(tuán)共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。激發(fā)和發(fā)射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應(yīng)用于各種基于熒光的實(shí)驗(yàn)中。Cy5.5是一種遠(yuǎn)紅色(和近紅外)發(fā)射染...
熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外,目標(biāo)蛋白還可以通過熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作,如***跟蹤、細(xì)胞分選等。 FITC熒光標(biāo)記的原理是什么? 熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時,它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時,它會發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價結(jié)合在目標(biāo)分子的基團(tuán)上,利用其熒光特性提供研究對象的信息。 CY7 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫,是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成...
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標(biāo)記效率低——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應(yīng)降低了標(biāo)記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標(biāo)記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會影響標(biāo)記效率。3)標(biāo)記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍(lán)蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團(tuán)。雖然熒光團(tuán)可用于在細(xì)胞、細(xì)菌和各種***中表達(dá)質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點(diǎn),即它可能很耗時,并且在融合時還能夠改變某些細(xì)胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外,與許多其他熒光團(tuán)相比,生物熒光團(tuán)的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團(tuán)之一,由238個氨基酸組成,其中三個負(fù)責(zé)發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團(tuán)與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當(dāng)添加鈣時會發(fā)出藍(lán)光。通過DNA重組,研究人員可以使用負(fù)責(zé)...
異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,F(xiàn)ITC):FITC是應(yīng)用*為***的一種熒光素,經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出明亮的黃綠色熒光,*大發(fā)射波長為525nm。FITC的熒光強(qiáng)度受PH影響較大,常隨著PH的降低而減弱,因此,在使用FITC時需格外注意溶液的酸堿度。a)電泳分離后的蛋白質(zhì)檢測(b)蛋白質(zhì)和肽的微測序分析(c)使用毛細(xì)管區(qū)帶電泳進(jìn)行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(e)細(xì)胞和組織切片中的抗原檢測(f)通過標(biāo)記DNA片段進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯(lián)物制備外,異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光(由于偶聯(lián)后的大消光系數(shù)和高量子產(chǎn)率),使其...
光熱***是另一個吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中,吲哚菁綠可以被引入**組織,并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能,從而使**組織受到熱損傷,達(dá)到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性,可以精確地破壞**組織而對正常組織幾乎沒有影響。這種精細(xì)的***方式有助于減少***的副作用,提高***效果。吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合,通過檢測其熒光信號來實(shí)現(xiàn)對這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分,將藥物包裹...
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級)儲存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性?!耢`敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍。●信噪比高:樣品熒光信號強(qiáng),背景信號低?!癫僮骱唵危簾o須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察?!襁m用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等?!袷褂梅奖悖簩Ψ肿由飳W(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反...
藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復(fù)合物,屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到,它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學(xué)中,熒光團(tuán)可以與蛋白質(zhì)結(jié)合,例如用于抗原檢測的抗體等,因?yàn)樗軌虬l(fā)出明亮的熒光。由于熒光團(tuán)往往會很快發(fā)生光漂白,因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細(xì)胞術(shù)?!鶆e藻藍(lán)蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣,別藻藍(lán)蛋白也屬于藻膽蛋白家族,是從紅藻中分離出來的。在594和633nm的激光線激發(fā)下,熒光團(tuán)的比較大吸光度在650nm處,而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比,熒光團(tuán)的靈敏度已顯示高5至10倍,并具有許多其他有益特性,包括大斯托克斯位移、高水溶性、長波長...
Cy5:激發(fā)波長633/635nm,比較大發(fā)射波長670nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL4通道檢測;3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于APC。5)與單核和粒細(xì)胞非特異性結(jié)合多,易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。 5、PE:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長575nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測;3)其熒光泯滅性強(qiáng),不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù),但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。 6、PE-TR:激發(fā)波長48...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL,詳細(xì)計算過程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3...
注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,從而確定比較高信號檢測時間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對儲存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?,穩(wěn)定性和保存時間更長。 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來看,鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)...
羰花青染料***用作Di來標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們在脂質(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們在室溫下是油狀物,在水中發(fā)出微弱熒光,但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時,它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞,這些染料就會在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散,導(dǎo)致...
小動物***成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù),可以在***小動物體內(nèi)實(shí)時觀察和研究細(xì)胞、組織和***的功能和代謝過程。這種染料具有以下幾個特點(diǎn):1.高度選擇性:小動物***成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合,使其在***成像過程中能夠清晰地顯示出來,從而提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和信息。2.高亮度和穩(wěn)定性:該染料具有較高的熒光亮度和穩(wěn)定性,能夠在長時間的觀察過程中保持熒光信號的強(qiáng)度和穩(wěn)定性,確保數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性。3.低毒性和無刺激性:小動物***成像熒光染料在使用過程中對小動物的生理功能和行為沒有明顯的影響,具有較低的毒性和無刺激性,保證了實(shí)驗(yàn)的可靠性和動物的福利。4.多功能性:該染料可以用于多...
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲存液:儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲存液保存在-20°C,避免反復(fù)凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5μM的工作液。注意:工作液的**終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。 2.懸浮細(xì)胞染色(1)懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2~20分鐘,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時間不同。(3)染色細(xì)胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。...
使用螢火蟲熒光素酶(Fluc)作為報告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像(BLI)是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號強(qiáng)度相對于 D-熒光素注射后的時間進(jìn)行繪制,以生成時間-強(qiáng)度曲線。除了峰值信號外,還確定注射 D-熒光素后固定時間點(diǎn)(5、10、15 和 20 分鐘)的信號作為峰值信號的替代。給定時間-強(qiáng)度曲線中的信號針對曲線中的峰值信號進(jìn)行歸一化,以表示 D-熒光素注射后時間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素(腹膜內(nèi)或靜脈注射)儲備液:對于 20 g 小鼠,標(biāo)準(zhǔn) 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素(鉀鹽或鈉鹽)并溶解在 dPBS...
羅丹明123一種可對活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,此熒光染料被應(yīng)用于檢測細(xì)胞內(nèi)的ATP。羅丹明123的比較大激發(fā)波長為507nm,比較大發(fā)射波長為525nm。在熒光顯微鏡下觀察,呈現(xiàn)黃綠色熒光。 一:工作液配制用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)液直接稀釋儲存液到需要的工作液濃度(1~20μM),充分混勻。具體的工作液濃度使用者要根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行調(diào)整?!咀⒁狻浚簩τ诩?xì)胞實(shí)驗(yàn),要控制好總體稀釋倍數(shù),DMSO在...
D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲產(chǎn)生典型的黃綠色光。該反應(yīng)的 560 nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到峰值,當(dāng)?shù)孜餆晒馑剡^量時,光輸出與熒光素酶濃度成正比。熒光素酶 (luc) 基因是用于研究和藥物篩選的流行報告基因?;瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)幾乎沒有背景,使得 luc 報告基因成為檢測低水平基因表達(dá)的理想選擇。標(biāo)準(zhǔn)閃爍計數(shù)器可以可靠地測量低至 0.02 pg 的熒光素酶。除了作為基因表達(dá)報告者的作用外,熒光素酶還常用于極其靈敏的 ATP 檢測中[1]。我們提供螢火蟲熒光素酶 (HY-P1004)、熒光素游離酸 (HY-12591A) 及其水溶性鈉鹽 (HY-12591) 和鉀鹽 (H...
羅丹明屬于呫噸族。與市場上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們在聚合物納米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個氮處具有兩個烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...