羰花青染料***用作Di來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗?,在水中發(fā)出微弱熒光,但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí),它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞,這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散,導(dǎo)致...
CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測(cè)和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料,其*大發(fā)射波長(zhǎng)為670nm,其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀,檢測(cè)通道一般是FL4通道。除流式細(xì)胞術(shù)外,Cy5同樣適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)。需注意的是,Cy5與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的非特異性結(jié)合多,實(shí)驗(yàn)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。Cy5.5含有一個(gè)游離胺基,可與多種官能團(tuán)共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。激發(fā)和發(fā)射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應(yīng)用于各種基于熒光的實(shí)驗(yàn)中。Cy5.5是一種遠(yuǎn)紅色(和近紅外)發(fā)射染...
熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長(zhǎng)的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL(zhǎng)較長(zhǎng)的可見光波而反射出來(lái),呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。其中復(fù)合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個(gè)供體及一個(gè)受體熒光物分子所組成。復(fù)合染料在受體分子的激發(fā)波長(zhǎng)被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)射一個(gè)光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個(gè)光譜范圍。異硫氰酸熒光素(FITC)...
細(xì)胞培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段,然而,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說,想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見的問題。 細(xì)胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細(xì)胞膜染料(見表2),它們是一族親脂性的熒光染料,用于細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進(jìn)入細(xì)胞膜后,會(huì)在整個(gè)...
小動(dòng)物***成像技術(shù)(invivoimagingtechnology)是利用高靈敏度的光學(xué)檢測(cè)儀器直接檢測(cè)動(dòng)物***體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為研究的一類技術(shù),是近年來(lái)發(fā)展**快的生命科學(xué)研究方法,是**直接觀察細(xì)胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域[1]。***動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是利用熒光素酶報(bào)告基因在***內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。而熒光發(fā)光成像技術(shù)是將熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標(biāo)記的小分子物質(zhì)如基因、細(xì)胞也可是小分子藥物、抗體、納米材料等導(dǎo)入到***體內(nèi),通過小動(dòng)物***成像系統(tǒng)的激發(fā)光源激發(fā)...
3.粘壁細(xì)胞的染色(1)使粘壁的細(xì)胞在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。(4)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2~20分鐘,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。 4.顯微鏡檢測(cè)(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。(2)多色染料的同時(shí)檢測(cè),濾光器按照以下設(shè)定:a)DiI和DiO=OmegaXF52,Chroma51004;b)DiI和D...
綠色熒光染料ICG的主要作用吲哚菁綠(IndocyanineGreen,簡(jiǎn)稱ICG)是一種廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域的熒光染料。它具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì),因此被***用于熒光顯像、光熱***、生物識(shí)別和藥物輸送等領(lǐng)域。吲哚菁綠的綠色溶解度是其在水中的溶解度,它是衡量該染料在溶液中的溶解能力的重要指標(biāo)。吲哚菁綠具有較好的水溶性,可以在水中迅速溶解,形成穩(wěn)定的溶液。這一特性使得吲哚菁綠在醫(yī)學(xué)診斷和***中得到廣泛應(yīng)用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。由于其具有強(qiáng)烈的熒光特性,能夠在近紅外光譜范圍內(nèi)吸收和發(fā)射光線,因此被***用于近紅外熒光顯像技術(shù)中。在臨床中,醫(yī)生可以通過注射吲哚...
Cy5:激發(fā)波長(zhǎng)633/635nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)670nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL4通道檢測(cè);3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于APC。5)與單核和粒細(xì)胞非特異性結(jié)合多,易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。 5、PE:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)575nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè);3)其熒光泯滅性強(qiáng),不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù),但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。 6、PE-TR:激發(fā)波長(zhǎng)48...
InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料,可使用532nm激光線激發(fā),并使用TRITC(四甲基羅丹明)濾光片組進(jìn)行可視化。除了免疫細(xì)胞化學(xué)應(yīng)用,Cy3染料通常用于標(biāo)記核酸。發(fā)光說明:Cy3熒光團(tuán)也是親脂性神經(jīng)元和長(zhǎng)期DiI細(xì)胞追蹤試劑的基礎(chǔ),該試劑添加烷基尾(≥12個(gè)碳)添加到**熒光團(tuán)上。Cy3染料是用于成像、流式細(xì)胞術(shù)和基因組應(yīng)用的蛋白質(zhì)和核酸結(jié)合物的傳統(tǒng)橙色熒光標(biāo)簽。它也是經(jīng)典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎(chǔ)。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu),Cy3可分為普通Cy3(常簡(jiǎn)稱Cy3)和磺化Cy3(Sulfo-Cy3)。Cy3水溶性較低,在水相標(biāo)記反應(yīng)時(shí)常常需要使用有機(jī)共溶劑,常用有機(jī)溶劑包括DM...
為什么要使用熒光染料?雖然不同的染色技術(shù)(即考馬斯染色、銀染色、熒光染色)可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì),但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供:高靈敏度:對(duì)于大多數(shù)分析物,熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍,即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿意地達(dá)到ppt(萬(wàn)億分之一)的檢測(cè)限。寬線性動(dòng)態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾:由于吸收光的材料數(shù)量眾多,分光光度測(cè)量通常會(huì)遇到干擾問題。在進(jìn)行熒光測(cè)量時(shí)不會(huì)遇到這個(gè)問題,因?yàn)橹挥猩贁?shù)材料具有熒光能力。高通量:熒光測(cè)量具有簡(jiǎn)單而強(qiáng)大的協(xié)議,并且可以自動(dòng)化用于高通量應(yīng)用。異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫...
異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,F(xiàn)ITC):FITC是應(yīng)用*為***的一種熒光素,經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出明亮的黃綠色熒光,*大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。FITC的熒光強(qiáng)度受PH影響較大,常隨著PH的降低而減弱,因此,在使用FITC時(shí)需格外注意溶液的酸堿度。a)電泳分離后的蛋白質(zhì)檢測(cè)(b)蛋白質(zhì)和肽的微測(cè)序分析(c)使用毛細(xì)管區(qū)帶電泳進(jìn)行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(cè)(e)細(xì)胞和組織切片中的抗原檢測(cè)(f)通過標(biāo)記DNA片段進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測(cè)除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯(lián)物制備外,異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光(由于偶聯(lián)后的大消光系數(shù)和高量子產(chǎn)率),使其...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL,詳細(xì)計(jì)算過程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3...
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲(chǔ)存液:儲(chǔ)存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲(chǔ)存液保存在-20°C,避免反復(fù)凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無(wú)血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲(chǔ)存液,配制濃度為1~5μM的工作液。注意:工作液的**終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。 2.懸浮細(xì)胞染色(1)懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2~20分鐘,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。(3)染色細(xì)胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度**增強(qiáng),這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,比較好濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 D...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度**增強(qiáng),這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,比較好濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 D...
與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機(jī)染料。熒光素的比較大吸收波長(zhǎng)為494nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)為521nm(通常吸收藍(lán)色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光),熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測(cè)到它,并且在與抗體結(jié)合時(shí)用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣,熒光素價(jià)格低廉且易于使用,使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同,熒光素在水溶液中是無(wú)毒的。因此,它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)...
FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點(diǎn):活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團(tuán),生成分子探針,并通過熒光成像進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時(shí),它們成為用于檢測(cè)靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無(wú)放射物污染、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。 南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fl...
Cy7DiC18(DiR)是一個(gè)親脂性、近紅外熒光花青染料。這個(gè)染料常用于標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)膜。Cy7DiC18(DiR)的兩個(gè)18-碳鏈插入到細(xì)胞膜,從而進(jìn)行特定的、穩(wěn)定的細(xì)胞染色,幾乎不會(huì)發(fā)生細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移。Cy7DiC18(DiR)(近紅外熒光)和其他細(xì)胞膜熒光染料如DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)配合使用,為多色成像和流式細(xì)胞分析提供了有效的工具。Cy7DiC18(DiR)染色后可進(jìn)行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進(jìn)行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用0.1%TritonX-100透化)后,也可以很好地進(jìn)行質(zhì)膜染色。 1、C...
異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。在495/517nm處,該染料會(huì)產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)與不同抗體結(jié)合,該基團(tuán)可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質(zhì)量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料,且其被當(dāng)成AlexaFluor?488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍(lán)色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時(shí)使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-...
如何選擇的染料? 考慮到熒光染料種類繁多,您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功,請(qǐng)選擇與您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性:選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時(shí),請(qǐng)考慮儀器的靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果,請(qǐng)確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測(cè)方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性:在雙重或三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,您選擇的染料的發(fā)射和激...
藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復(fù)合物,屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到,它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學(xué)中,熒光團(tuán)可以與蛋白質(zhì)結(jié)合,例如用于抗原檢測(cè)的抗體等,因?yàn)樗軌虬l(fā)出明亮的熒光。由于熒光團(tuán)往往會(huì)很快發(fā)生光漂白,因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細(xì)胞術(shù)。※別藻藍(lán)蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣,別藻藍(lán)蛋白也屬于藻膽蛋白家族,是從紅藻中分離出來(lái)的。在594和633nm的激光線激發(fā)下,熒光團(tuán)的比較大吸光度在650nm處,而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比,熒光團(tuán)的靈敏度已顯示高5至10倍,并具有許多其他有益特性,包括大斯托克斯位移、高水溶性、長(zhǎng)波長(zhǎng)...
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料,具有廣泛的應(yīng)用,作為抗體和其他探針標(biāo)記,用熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實(shí)驗(yàn)。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性,是流式細(xì)胞儀和免疫熒光中生物檢測(cè)**常用的熒光標(biāo)記之一。**常用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物,以及一系列具有針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記...
熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外,目標(biāo)蛋白還可以通過熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作,如***跟蹤、細(xì)胞分選等。 FITC熒光標(biāo)記的原理是什么? 熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時(shí),它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時(shí),它會(huì)發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價(jià)結(jié)合在目標(biāo)分子的基團(tuán)上,利用其熒光特性提供研究對(duì)象的信息。 羰花青染料用作 Di 來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。黑龍江鄭州熒光染料三、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)D-熒光素鉀鹽...
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料,具有廣泛的應(yīng)用,作為抗體和其他探針標(biāo)記,用熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實(shí)驗(yàn)。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性,是流式細(xì)胞儀和免疫熒光中生物檢測(cè)**常用的熒光標(biāo)記之一。**常用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物,以及一系列具有針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記...
管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點(diǎn):這些高熒光合成納米晶體由半導(dǎo)體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應(yīng)用和該領(lǐng)域的顯著進(jìn)步,已經(jīng)針對(duì)特定應(yīng)用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來(lái),大量復(fù)雜的熒光技術(shù)(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。小動(dòng)物成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù)可以在小動(dòng)...
羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來(lái)區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無(wú)論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個(gè)氮處具有兩個(gè)烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
為什么要使用熒光染料?雖然不同的染色技術(shù)(即考馬斯染色、銀染色、熒光染色)可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì),但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供:高靈敏度:對(duì)于大多數(shù)分析物,熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍,即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿意地達(dá)到ppt(萬(wàn)億分之一)的檢測(cè)限。寬線性動(dòng)態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾:由于吸收光的材料數(shù)量眾多,分光光度測(cè)量通常會(huì)遇到干擾問題。在進(jìn)行熒光測(cè)量時(shí)不會(huì)遇到這個(gè)問題,因?yàn)橹挥猩贁?shù)材料具有熒光能力。高通量:熒光測(cè)量具有簡(jiǎn)單而強(qiáng)大的協(xié)議,并且可以自動(dòng)化用于高通量應(yīng)用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。遼寧熒光染料Fluor 5...
熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記,其廣泛應(yīng)用于熒光免疫,熒光探針,細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑,可作為背景對(duì)照,標(biāo)記細(xì)胞核使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。熒光標(biāo)記的單克隆抗體技術(shù)為流式細(xì)胞儀在研究細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領(lǐng)域擴(kuò)展了無(wú)限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標(biāo)記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFl...
羰花青染料***用作Di來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗?,在水中發(fā)出微弱熒光,但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí),它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞,這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散,導(dǎo)致...
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...