中國澳門熒光染料納米

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-20

染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族,用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料,當(dāng)它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質(zhì),雖然在水中其熒光強(qiáng)度很弱)結(jié)合時(shí),其熒光強(qiáng)度***增強(qiáng)。它們具有很高的淬滅系數(shù),偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。一旦應(yīng)用于細(xì)胞中,這種染料會在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴(kuò)散,導(dǎo)致在其比較好濃度條件下,將整個(gè)細(xì)胞染色。它們不同的熒光顏色:DiI(橙色熒光)、DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)、DiR(深紅色熒光),為活細(xì)胞多色彩熒光成像分析和流式細(xì)胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標(biāo)準(zhǔn)的FITC和TRITC濾光器一同使用。其中,DiO可以被633 nm He-Ne激光激發(fā),并且具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長,為標(biāo)記細(xì)胞和組織的那些本身就具有本底熒光的染料提供了非常***的替代品。DiR在***成像或者示蹤中非常有用,因?yàn)樗鼈兯l(fā)射的紅外光可以高效地穿過細(xì)胞和組織,并且在紅外光范圍內(nèi),其本底熒光水平很低。吲哚菁綠(Indocyanine Green,簡稱ICG)是一種廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域的熒光染料。中國澳門熒光染料納米

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小動物***成像技術(shù)(invivoimagingtechnology)是利用高靈敏度的光學(xué)檢測儀器直接檢測動物***體內(nèi)的細(xì)胞活動和基因行為研究的一類技術(shù),是近年來發(fā)展**快的生命科學(xué)研究方法,是**直接觀察細(xì)胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域[1]。***動物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是利用熒光素酶報(bào)告基因在***內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。而熒光發(fā)光成像技術(shù)是將熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標(biāo)記的小分子物質(zhì)如基因、細(xì)胞也可是小分子藥物、抗體、納米材料等導(dǎo)入到***體內(nèi),通過小動物***成像系統(tǒng)的激發(fā)光源激發(fā)熒光集團(tuán)到達(dá)高能量狀態(tài),而后產(chǎn)生波長較激發(fā)光長的發(fā)射光,然后通過高靈敏度制冷CCD鏡頭探測到***內(nèi)的發(fā)射光。通過***成像技術(shù)可以觀測***動物體內(nèi)**的生長和轉(zhuǎn)移、炎癥的發(fā)生、特定基因的表達(dá)和藥物作用效果等生物學(xué)過程。重慶熒光染料激發(fā)Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亞胺酯熒光染料。

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Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖稀y3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細(xì)胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時(shí),Cy3的背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標(biāo)記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標(biāo)記核酸分子(DNA和RNA)?;跓晒鈭D譜的相似性,Cy3可以被TAMRA,TRITC, BODIPY TMR等染料替代,在需要更明亮,更穩(wěn)定的替代物時(shí),可以考慮使用AF547或者AF555等。

PI是一種可對DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測,常用于流式細(xì)胞儀分析。盡管PI不能通過活細(xì)胞膜,但卻能穿過破損的細(xì)胞膜而對核染色。PI經(jīng)常被用來與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用,能同時(shí)對活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535nm和615nm。2.染色過程(1)將1/10培養(yǎng)基體積的PI染色液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中(也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養(yǎng)基)。(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10~20分鐘。(3)用PBS或合適的緩沖液洗滌細(xì)胞兩次。(4)用535nm激發(fā)波長,615nm發(fā)射波長的濾光器的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項(xiàng):PI對人體有刺激性,請注意適當(dāng)防護(hù)。Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖稀?/p>

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注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,從而確定比較高信號檢測時(shí)間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對儲存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?,穩(wěn)定性和保存時(shí)間更長。 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時(shí)間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來看,鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右。寧夏顯微鏡熒光染料

熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。中國澳門熒光染料納米

CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個(gè)甲基單元連接的兩個(gè)氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點(diǎn)CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標(biāo)記,對于蛋白抗體的標(biāo)記,可以通過簡單的混合反應(yīng)來完成結(jié)合,下面我們介紹了蛋白抗體標(biāo)記的標(biāo)記方法,具有一定的參考意義。一、比較好蛋白制備1)為獲得標(biāo)記效果,請制備蛋白(抗體)濃度為2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值為8.5±0.5。如果pH值低于8.0,應(yīng)使用1M3)如果蛋白濃度低于2mg/mL,標(biāo)記效率會**降低。為獲得比較好標(biāo)記效率,建議**終蛋白濃度范圍為2-10mg/mL。4)蛋白必須在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)的緩沖液中,和銨離子,否則會影響標(biāo)記效率。2.染色制備(以CY3-NHS酯為例)將無水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,制備成10mM儲備液。通過移液器或渦旋混合均勻計(jì)算。使用前需先使用縮合液(500μg/mL)(HY-D0178)活化另一個(gè)可進(jìn)行后續(xù)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。中國澳門熒光染料納米

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