異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。在495/517nm處,該染料會(huì)產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)與不同抗體結(jié)合,該基團(tuán)可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質(zhì)量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料,且其被當(dāng)成AlexaFluor®488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍(lán)色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時(shí)使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反,TRITC并非熒光素,而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個(gè)大的共軛芳香電子系統(tǒng),正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。還有一點(diǎn)與FITC相反,TRITC(479g/mol)由比較**長(zhǎng)為550nm的綠色光譜中的光所激發(fā),它的比較大發(fā)射波長(zhǎng)為573nm。與蛋白質(zhì)(例如,抗體)結(jié)合也基于異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍??贵w熒光染料橙色
控制pH值熒光染料的熒光強(qiáng)度通常會(huì)隨pH值的變化而變化。WangChao-xia在2010年的研究中指出,對(duì)于熒光黃染料,熒光強(qiáng)度隨著pH值的增加而降低,當(dāng)pH值在7~9時(shí),熒光強(qiáng)度基本保持不變34。這表明在實(shí)際應(yīng)用中,可以通過調(diào)節(jié)溶液的pH值來優(yōu)化熒光染料的性能。不同的熒光染料對(duì)pH值的敏感性可能不同,因此在使用熒光染料時(shí),需要了解其在不同pH值下的性能變化規(guī)律,并根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行pH值的調(diào)整。例如,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,細(xì)胞內(nèi)的pH值環(huán)境可能會(huì)影響熒光染料的性能,因此需要選擇對(duì)pH值變化不敏感或在特定pH值范圍內(nèi)具有良好性能的熒光染料。控制溶劑溶劑的性質(zhì)也會(huì)對(duì)熒光染料的性能產(chǎn)生影響。例如,在某些情況下,加入適量的酒精溶劑可能會(huì)降低熒光染料的熒光強(qiáng)度。WangChao-xia的研究表明,當(dāng)向熒光黃染料中加入3%的酒精溶劑時(shí),熒光強(qiáng)度降低約10%34。此外,溶劑的極性、粘度等性質(zhì)也可能會(huì)影響熒光染料的熒光性能。在實(shí)際應(yīng)用中,需要根據(jù)熒光染料的特性選擇合適的溶劑,并控制溶劑的性質(zhì)以提高熒光染料的性能。西藏大連熒光染料脂溶性熒光染料cy3、cy5、cy7等。
注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲(chǔ)存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?,穩(wěn)定性和保存時(shí)間更長(zhǎng)。 注射方式,動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定比較好信號(hào)平臺(tái)期和比較好的檢測(cè)時(shí)間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來看,鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
控制聚集狀態(tài)熒光染料的聚集狀態(tài)會(huì)影響其熒光性能。江琳等人在2024年的研究中指出,氟硼熒染料在生物環(huán)境中的聚集猝滅效應(yīng)限制了其實(shí)際應(yīng)用3235。通過在氟硼熒染料的meso位引入具有大空間位阻的三甲基苯,可以有效抑制聚集誘導(dǎo)的發(fā)光猝滅,提高熒光染料的性能。在實(shí)際應(yīng)用中,可以通過控制熒光染料的濃度、添加表面活性劑等方法來調(diào)節(jié)其聚集狀態(tài),從而提高其熒光性能。例如,適量添加表面活性劑可以增加染料的熒光強(qiáng)度34??刂骗h(huán)境中的其他因素除了上述因素外,環(huán)境中的其他因素也可能會(huì)影響熒光染料的性能。例如,在地下水流動(dòng)追蹤中,熒光染料的定量測(cè)定會(huì)受到溶液pH值、溫度、天然有機(jī)物的共存以及過濾等因素的影響37??梢酝ㄟ^緩沖溶液調(diào)節(jié)pH值、調(diào)整樣品溫度、研究天然有機(jī)物的熒光/淬滅特性以及使用清洗過的聚四氟乙烯過濾器等方法來控制這些因素的影響。在熒光染料廢水處理中,需要考慮廢水的COD、BOD5、NH3-N、SS等指標(biāo),通過沉淀氣浮一體化設(shè)備和SBR工藝等方法進(jìn)行處理,以降低廢水對(duì)環(huán)境的影響33。綜上所述,在實(shí)際應(yīng)用中,可以通過控制溫度、pH值、溶劑、聚集狀態(tài)以及環(huán)境中的其他因素等方法來有效提高熒光染料的性能。羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。
管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點(diǎn):這些高熒光合成納米晶體由半導(dǎo)體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應(yīng)用和該領(lǐng)域的顯著進(jìn)步,已經(jīng)針對(duì)特定應(yīng)用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來,大量復(fù)雜的熒光技術(shù)(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族,用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。合肥熒光染料Cy7.5
生物發(fā)光是利用熒光素酶報(bào)告基因在體內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。抗體熒光染料橙色
除了以上應(yīng)用,吲哚菁綠還可以用于生物識(shí)別和藥物輸送。在生物識(shí)別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)這些分子的檢測(cè)和定量分析。這項(xiàng)技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用前景。此外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分,將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中,通過近紅外光***釋放藥物,實(shí)現(xiàn)靶向***。吲哚菁綠作為一種多功能的熒光染料,在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。其綠色溶解度的優(yōu)良性能,使其能夠在水溶液中快速溶解,為其在醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識(shí)別和藥物輸送等方面的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信吲哚菁綠在未來將發(fā)揮更大的潛力,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。吲哚菁綠作為一種熒光染料,在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中的應(yīng)用是**為突出的。它可以通過靜脈注射進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng),并在近紅外激光的照射下發(fā)出熒光信號(hào)。這種熒光信號(hào)可以被**的顯像設(shè)備捕獲和記錄,從而形成高分辨率、高對(duì)比度的影像。這樣的影像可以幫助醫(yī)生觀察和分析血管、淋巴系統(tǒng)以及**等病變的情況,提供重要的診斷依據(jù)??贵w熒光染料橙色