蘇州小鼠疾病動(dòng)物模型建模

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-17

    引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動(dòng)物模型,并對(duì)比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時(shí)間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動(dòng)物模型比較好劑量提供了一種操作簡(jiǎn)單,成功率高,結(jié)果可靠的實(shí)驗(yàn)方法。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場(chǎng)常規(guī)購(gòu)買(mǎi)得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地,注射期間每天稱(chēng)量大鼠體重,注射后每周稱(chēng)量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測(cè)***水平,取卵巢檢測(cè)對(duì)比卵巢重量。早期階段科學(xué)假說(shuō)與疾病潛在藥物治療效果評(píng)價(jià)始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實(shí)驗(yàn)室研究。蘇州小鼠疾病動(dòng)物模型建模

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    可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無(wú)特別說(shuō)明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過(guò)正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)方法等,若無(wú)特別說(shuō)明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)方法等。實(shí)施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中。哪一家疾病動(dòng)物模型建模廠家開(kāi)展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識(shí)間的差距!

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1、動(dòng)物模型名稱(chēng):淚腺摘除聯(lián)合新潔爾滅致干眼兔模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí),1、實(shí)驗(yàn)方法:摘除淚腺聯(lián)合新潔爾滅誘導(dǎo)。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射進(jìn)速眠新Ⅱ進(jìn)行麻醉。麻醉后,進(jìn)行淚腺摘除手術(shù),眼瞼局部以75%酒精消毒,鋪洞巾,于眼下眶周部做一切口,小心分離皮膚、肌肉、筋膜,尋找到淚腺后完整摘除之,然后縫合創(chuàng)口。術(shù)畢,滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環(huán)素可的松眼藥膏,共7d。術(shù)后兔創(chuàng)口愈合后進(jìn)行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液,2次/天,2滴/次,連續(xù)用藥14d。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):SchirmerI試驗(yàn)淚液分泌減少,1%虎紅角膜染色試驗(yàn)虎紅著色評(píng)分值高,角膜出現(xiàn)病理改變。

    圖2是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過(guò)具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上,鋪無(wú)菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口,切開(kāi)皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會(huì)對(duì)腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會(huì)對(duì)腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤(pán)突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。動(dòng)物模型作為人類(lèi)疾病的縮影。

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1、自發(fā)性**動(dòng)物模型:未經(jīng)人為處理;自然發(fā)生;自發(fā)性**的總體評(píng)價(jià)--動(dòng)物自發(fā)性**的病因往往是由動(dòng)物的遺傳特性決定的與人癢的病因有較大距離。各動(dòng)物**生長(zhǎng)速度差異較大很難在限定時(shí)間內(nèi)獲得大量生長(zhǎng)均勻的荷瘤動(dòng)物(tumor-bearinganimals)。因此,自發(fā)性**動(dòng)物模型很少在抗**藥物的常規(guī)篩選中廣泛應(yīng)用。2、誘發(fā)性**動(dòng)物模型:在實(shí)驗(yàn)條件下:使用致*物(carcinogens);誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生**的動(dòng)物模型,它是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)**學(xué)研究的常用方法。常用于驗(yàn)證可疑致*因素的作用也越來(lái)越多地應(yīng)用干**發(fā)生機(jī)理的研究及防治效果的觀察上,在**病因?qū)W、遺傳學(xué)、生物學(xué)等方面的研究中有重要地位。由于誘發(fā)因素和條件可人為控制,誘發(fā)率遠(yuǎn)高于自然發(fā)病率故在**實(shí)驗(yàn)研究中優(yōu)于自發(fā)瘤。用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的動(dòng)物種類(lèi)很多,它們因種族不同而對(duì)相同致*因素有不同的反應(yīng)性。常用的動(dòng)物以哺乳動(dòng)物為主,其中嚙齒類(lèi)動(dòng)物的使用**多,應(yīng)用**廣,包括各種大鼠、小鼠、際鼠等。。小鼠疾病模型研究也是人相關(guān)疾病藥物研發(fā)的起點(diǎn)。普陀區(qū)疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)

如何定義好的小鼠疾病模型?蘇州小鼠疾病動(dòng)物模型建模

    pcrmix:反應(yīng)條件:pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號(hào)為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒(méi)有這兩個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng),引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴(kuò)增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒(méi)有。pcr體系:反應(yīng)條件:(2)f1代小鼠測(cè)序:通過(guò)pcr擴(kuò)增后測(cè)序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號(hào)pirb基因敲入小鼠測(cè)序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測(cè)f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測(cè)過(guò)程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過(guò)pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。蘇州小鼠疾病動(dòng)物模型建模

上海東寰生物科技有限公司坐落在上海市嘉定區(qū)興賢路1180號(hào)5幢2樓206室,是一家專(zhuān)業(yè)的經(jīng)營(yíng)范圍為:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù)?;ぎa(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品)的銷(xiāo)售?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】。公司。一批專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型。一直以來(lái)公司堅(jiān)持以客戶(hù)為中心、原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型市場(chǎng)為導(dǎo)向,重信譽(yù),保質(zhì)量,想客戶(hù)之所想,急用戶(hù)之所急,全力以赴滿(mǎn)足客戶(hù)的一切需要。

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