EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)如何組成?河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司
羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑,經(jīng)過(guò)10mM羥基脲提0min處理的細(xì)胞,綠色熒光陽(yáng)性的細(xì)胞幾乎完全消失,因此常被用作EdU實(shí)驗(yàn)的陰性對(duì)照。配制好的Click-iT Additive Solution請(qǐng)根據(jù)每次用量適當(dāng)分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融。Click-iT Additive Solution融化后有白色物質(zhì)析出為正常現(xiàn)象,請(qǐng)上下顛倒幾次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色,則說(shuō)明有效成分降解,不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細(xì)胞的細(xì)胞懸液,以及其他含多種細(xì)胞類(lèi)型的混合細(xì)胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細(xì)胞的同時(shí),維持白細(xì)胞的光散射特性。本試劑盒做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)可能需要更多的EdU,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用合適稀釋液稀釋后使用。北京咨詢(xún)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)dU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒找哪家比較安心?上海東寰不錯(cuò)。
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒穩(wěn)定:適用于對(duì)細(xì)胞增殖狀況的連續(xù)觀察●經(jīng)濟(jì):無(wú)需裂解細(xì)胞,細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)或用于其他實(shí)驗(yàn)●可靠:文獻(xiàn)引用率高,Pubmed有上千篇文獻(xiàn)的引用AlamarBlue®的應(yīng)用●監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖狀態(tài)、研究細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡●監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)因子活性,評(píng)估生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響●物尤其是藥物的開(kāi)發(fā)●環(huán)境污染物質(zhì)的評(píng)估,細(xì)胞毒分析●效價(jià)評(píng)估細(xì)胞增殖過(guò)程中,細(xì)胞體內(nèi)的環(huán)境由氧化環(huán)境變化成還原環(huán)境,呼吸鏈中的NADPH/NADP, FADH/FAD, FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin (刃天青)是一種無(wú)毒、可透膜的藍(lán)色染料,有微弱的熒光性EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么?上海東寰告訴您。
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類(lèi)似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒(méi)有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào),分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)如今市場(chǎng)的影響。河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司
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保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項(xiàng):由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面,由于96孔板周?chē)蝗θ菀渍舭l(fā),可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固,使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色,需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司
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