傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在哪?福建哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒價(jià)格
上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問(wèn)題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn):安全—–不使用[3H]thymidine,無(wú)放射性污染。簡(jiǎn)單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測(cè)。無(wú)需DNA變性和孵育抗體。江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒到底有什么好處?
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。
BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體,由于空間位阻,雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide),無(wú)需DNA變性,操作更便捷,兼容性好,檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測(cè)快速。相對(duì)于BrdU法,本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測(cè)新合成的DNA,所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后,增殖的細(xì)胞呈棕色,可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果參見(jiàn)圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果圖。無(wú)EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列);EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列);而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后,棕色染色減弱,說(shuō)明DNA合成被抑制后,EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)的用途有哪些?上海東寰告訴您。
與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒給社會(huì)帶來(lái)了什么好處?福建咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好
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保存條件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB顯色液A和DAB顯色液B須避光保存。注意事項(xiàng):ClickAdditive配制成溶液后請(qǐng)注意適當(dāng)分裝。如果溶解后有白色物質(zhì)析出,請(qǐng)上下顛倒多次,待全部溶解后使用。如果該溶液顏色變成棕色,說(shuō)明該組分的有效成分已失效,請(qǐng)棄用。DAB對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。由于本產(chǎn)品需要銅離子催化進(jìn)行點(diǎn)擊反應(yīng),請(qǐng)注意如下的兼容性問(wèn)題及解決方案。本產(chǎn)品完全兼容有機(jī)類染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染福建哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒價(jià)格