如何選擇的染料?
考慮到熒光染料種類繁多,您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功,請選擇與您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性:選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時,請考慮儀器的靈敏度、動態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果,請確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性:在雙重或三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,您選擇的染料的發(fā)射和激發(fā)曲線不應(yīng)與其他熒光團(tuán)重疊。由于許多天然存在的細(xì)胞成分會以與您選擇的染料或探針相同的波長發(fā)出熒光,因此您還需要確??梢詮谋尘白园l(fā)熒光中清楚地識別所選染料產(chǎn)生的信號。 Super Fluor 750(效果同Alexa Fluor 750)熒光染料。重慶熒光染料脂溶
三、流式細(xì)胞儀分析1、取對數(shù)生長期的細(xì)胞,接種到孔板,過夜培養(yǎng)。2、如果要進(jìn)行藥物刺激,在細(xì)胞中加入感興趣的藥物進(jìn)行干預(yù),繼續(xù)培養(yǎng)一定時間后,收集細(xì)胞,PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細(xì)胞,37℃避光孵育15min或更長時間。【注意】:由于細(xì)胞種類和實(shí)驗(yàn)體系不同,Rhodamine123工作液濃度和孵育時間可以根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)自行調(diào)整。4、用流式細(xì)胞儀檢測。
四、實(shí)驗(yàn)案例1、取對數(shù)生長期A549細(xì)胞接于六孔板(1*106+2mlDMEM培養(yǎng)基),37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-24h待其貼壁,以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作.2、棄掉培養(yǎng)液,PBS洗滌兩次.3、用培養(yǎng)基(無血清)稀釋Rh123母液制備1~20μMRh123工作液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。4、將Rh123工作液加入六孔板并在37℃下孵育30分鐘.5、去除Rh123工作液并用PBS洗滌三次細(xì)胞去除背景色.6、熒光顯微鏡觀察. 重慶光敏劑熒光染料DAPI染色液(DAPI Staining Solution)常用于細(xì)胞核染色,可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。
琥珀酰亞胺酯(Succinimidylesters)/NHS酯活性熒光染料用于標(biāo)記抗體,蛋白質(zhì),肽,胺修飾的寡核苷酸和其他生物分子上的游離氨基(-NH2)2、馬來酰亞胺(Maleimides)活性熒光染料用于標(biāo)記抗體,蛋白質(zhì)和肽上的巰基3、疊氮化物(Azides)活性熒光染料通過點(diǎn)擊化學(xué)法(Click)標(biāo)記乙烯基4、炔烴(Alkynes)活性熒光染料通過點(diǎn)擊化學(xué)方法標(biāo)記疊氮化物5、羧酸(Carboxylicacids)活性熒光染料經(jīng)碳二亞胺預(yù)活化后用于標(biāo)記胺或用于醇的Steglich酯化6、氨基(Amines)活性熒光染料具有游離氨基的熒光染料,用于與各種親電子化合物(如活化的酯和環(huán)氧化物)偶聯(lián)。
小動物***成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù),可以在***小動物體內(nèi)實(shí)時觀察和研究細(xì)胞、組織和***的功能和代謝過程。這種染料具有以下幾個特點(diǎn):1.高度選擇性:小動物***成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合,使其在***成像過程中能夠清晰地顯示出來,從而提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和信息。2.高亮度和穩(wěn)定性:該染料具有較高的熒光亮度和穩(wěn)定性,能夠在長時間的觀察過程中保持熒光信號的強(qiáng)度和穩(wěn)定性,確保數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性。3.低毒性和無刺激性:小動物***成像熒光染料在使用過程中對小動物的生理功能和行為沒有明顯的影響,具有較低的毒性和無刺激性,保證了實(shí)驗(yàn)的可靠性和動物的福利。4.多功能性:該染料可以用于多種小動物模型的***成像研究,包括小鼠、小魚、小豬等,適用于不同的研究領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。我們公司的小動?**成像熒光染料是經(jīng)過嚴(yán)格篩選和測試的高質(zhì)量產(chǎn)品,具有穩(wěn)定的性能和優(yōu)異的成像效果。我們致力于為科研人員和生命科學(xué)領(lǐng)域的專業(yè)人士提供**的成像技術(shù)和產(chǎn)品,幫助他們在研究中取得更準(zhǔn)確、更可靠的數(shù)據(jù)和結(jié)果。如果您對小動物***成像熒光染料感興趣或有任何疑問,請隨時聯(lián)系我們,我們將竭誠為您提供專業(yè)的技術(shù)支持和咨詢服務(wù)。謝謝CY7.5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸,納米粒子通常用于不同類型的細(xì)胞和組織的熒光成像。當(dāng)今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點(diǎn)、貴金屬納米顆粒、聚合物點(diǎn)、量子點(diǎn)和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中,與其他分子熒光團(tuán)和探針相比,納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢,使其成為理想的選擇。除了提高亮度外,納米粒子是惰性的并且往往分布均勻,這有助于在成像過程中獲得更好的結(jié)果。此外,與各種分子熒光團(tuán)相比,納米顆粒和納米材料沒有細(xì)胞毒性,并且不受非特異性結(jié)合問題的影響。由于這些特性,大多數(shù)熒光納米顆粒(染色納米顆粒)可以內(nèi)化到細(xì)胞/組織中,并容易靶向給定部位。Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亞胺酯熒光染料。中國澳門廈門熒光染料
PI常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測,常用于流式細(xì)胞儀分析。重慶熒光染料脂溶
異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。在495/517nm處,該染料會產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)與不同抗體結(jié)合,該基團(tuán)可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質(zhì)量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料,且其被當(dāng)成AlexaFluor®488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍(lán)色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反,TRITC并非熒光素,而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個大的共軛芳香電子系統(tǒng),正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。還有一點(diǎn)與FITC相反,TRITC(479g/mol)由比較**長為550nm的綠色光譜中的光所激發(fā),它的比較大發(fā)射波長為573nm。與蛋白質(zhì)(例如,抗體)結(jié)合也基于異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)。重慶熒光染料脂溶