河南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-01

但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測(cè)而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測(cè)的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時(shí)會(huì)和其它目的蛋白基于抗體的檢測(cè)相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng),無需使用抗體、操作便捷、檢測(cè)靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級(jí)換代的新方法,將會(huì)逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒在社會(huì)上的重要性。河南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案,準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案,整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。此外,該方法適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織切片,可用流式細(xì)胞術(shù)分析檢測(cè)EdUFlowCytometryKit594(BCK-FC594-100);可進(jìn)行HCS分析或進(jìn)行細(xì)胞裂解液微孔板檢測(cè)EdUHTSKit594(BCK-HTS594-20);也可適用于培養(yǎng)中的細(xì)胞,或通過注射方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的小動(dòng)物樣本,進(jìn)行體內(nèi)成像分析InVivoEdUClickKit594(BCK594-IV-IM-M)、流式細(xì)胞檢測(cè)或HCS高通量檢測(cè)。(共有488、555、594、647四種熒光染料可選)。河北咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家dU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒找哪家比較安心?上海東寰不錯(cuò)。

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EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。

該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?

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EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?福建提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商

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本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng),不會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),不會(huì)影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測(cè),也不會(huì)影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測(cè)細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測(cè)細(xì)胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測(cè)、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較參見圖2。河南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒