南京口碑好的疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-30

1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學(xué)性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜**90s后移去,立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。動物模型作為人類疾病的縮影。南京口碑好的疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱:酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-160g6、實驗動物環(huán)境:SPF級。1、實驗方法:用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油=1:3,連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標準:肝組織可見肝硬化病理改變(S1級~S4級)。奉賢區(qū)如何使用疾病動物模型建模開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識間的差距!

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人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物,動物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機制研究、新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選、藥效評價、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等醫(yī)學(xué)前沿領(lǐng)域。動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進行實驗所帶來的風(fēng)險(二)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來(三)可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點(四)可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性(五)可以簡化實驗操作和樣品收集(六)有助于更***地認識疾病的本質(zhì)

    具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進行驗證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。如何定義好的小鼠疾病模型?

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    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡,平均體重20g),46h后注射hcg,與雄性小鼠合籠交配,次日取受精卵進行顯微注射,將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi),產(chǎn)出小鼠,即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl,cas9蛋白購自newenglandbiolabs,貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr擴增產(chǎn)物測序,鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應(yīng)的擴增產(chǎn)物大小為,primers2對應(yīng)的擴增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。構(gòu)建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇?泌尿疾病動物模型建模評價

模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用,容易復(fù)制,實驗中便于操作和采集各種標本。南京口碑好的疾病動物模型建模

腰椎間盤突出是造成全球大部分地區(qū)工作缺失和活動受限的主要疾病,隨著日常生活節(jié)奏的不斷加快,腰椎間盤突出癥已經(jīng)成為臨床脊柱外科的常見病和多發(fā)病,而且發(fā)病人群越來越呈現(xiàn)年輕化及普遍化的趨勢。該病主要是由于腰椎長期的受力不均或突然性外傷,導(dǎo)致腰椎纖維環(huán)出現(xiàn)變形、破裂,纖維環(huán)、髓核及軟骨終板單獨或同時外突,從而壓迫到坐骨神經(jīng)、神經(jīng)根或馬尾神經(jīng),患者出現(xiàn)腰部疼痛,牽連股部,下肢足部放射性疼痛,引起神經(jīng)功能、運動功能障礙,特定身體部位出現(xiàn)麻痹或癱瘓癥狀。良好的腰椎間盤突出動物模型的建立,可以生動直觀的幫助醫(yī)療工作者理解腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)后,神經(jīng)的病理生理變化以及疾病的發(fā)***展規(guī)律,并可以通過成熟的動物模型,探索有效的***方法。近年來,隨著對腰椎間盤突出癥的認識研究的不斷深化,人們希望通過建立一種可靠、有效的腰椎間盤突出的動物模型,通過施加干預(yù)因素,更加準確地觀察模型體內(nèi)產(chǎn)生的變化,探究人體內(nèi)疾病發(fā)生機理,并將研究成果推廣到臨床,為***腰椎間盤突出癥提供合理、有效的防治手段。因此。南京口碑好的疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司總部位于上海市嘉定區(qū)興賢路1180號5幢2樓206室,是一家經(jīng)營范圍為:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)?;ぎa(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品)的銷售?!疽婪毥?jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】。的公司。上海東寰生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)?,為客戶提?**的原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型。上海東寰生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。上海東寰生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。

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